二化螟chilosuppesalis卵块的塑料法和稻株法比较研究.docxVIP

二化螟chilosuppesalis卵块的塑料法和稻株法比较研究 2-水稻是水稻科的一种重要害虫之一。近年来,其发生和为害有加重的趋势。目前,我国大部分稻区基本上采用杀虫剂防治二化螟。但是,利用抗虫性品种的水稻害虫可持续治理是未来研究的重点和努力的方向。我国早在20世纪80年代就开始了抗螟品种的筛选,近年来也广泛开展了抗螟转基因水稻的测定。在水稻材料抗螟性鉴定和评价中,国内外均采用的是从笼罩或产卵箱中的稻株上、田间或人工网室的稻苗上收集二化螟卵,待卵孵化后进行人工接虫。然而,作者在近年的转基因水稻抗螟性鉴定中发现上述采卵方法存在着卵块难于寻找、费工、费时和成本高等缺点。因此,作者于2003年采用了一种新的、高效而便捷的塑料袋法来收集二化螟卵块,并与笼罩稻株采卵法进行了比较,现将结果报道如下。 1 材料和方法 1.1 田间诱变剂的使用和判断 实验于2003年4～6月在中国水稻研究所富阳试验基地进行。采用的水稻品种是籼稻品种Taichung Native 1(TN1)。取稻田里移栽后30 d左右的稻株,1丛稻株移裁入1个小塑料桶(?12 cm×12 cm)中,剪去多余的次生分蘖,罩上纱网(40目),5 d后待用。收集二化螟卵采用的塑料袋是市售的家用塑料食品保鲜袋(38 cm×25 cm)。在田间二化螟成蛾发生高峰期,选取虫源较多的田块,在田埂设置200 W的诱蛾灯多个,灯下放置白色泡沫板。夜幕降临时分(6∶30 pm左右)接通电源,9∶00 pm左右采集雌蛾。 1.2 产卵及石化卵粒发育 每个塑料袋中放入1头灯诱采集来的二化螟雌蛾,同时放入10%蜂蜜水浸润过的棉花球1只,充气后用塑料夹夹住袋口,任其产卵(图1)。每2 d更换1次塑料袋,直至雌蛾死亡。剪下带卵块的塑料膜,放置于垫有湿润定性滤纸的培养皿(? 9 cm)中。每个塑料袋为1个重复,设40个重复。待卵粒出现“黑头”(卵发育后幼虫即将孵化)时,在双目立体显微镜下逐个计数发育卵的卵块数和卵粒数。待卵孵化结束后,计数未孵化卵粒数。统计单个雌蛾的产卵量、卵块数量和计算卵孵化率。 1.3 稻株的标记和培养液的制备 网罩的1丛水稻上接入1头灯诱采集来的二化螟雌蛾,任其产卵,直至雌蛾死亡。每个网罩为1个重复,设40个重复。接虫5 d后开始检查稻株上的卵块,在产有卵块的稻叶或叶鞘上用记号笔作标记。待稻株上的卵粒出现黑头时,剪下带有卵块的稻叶或叶鞘段,放置于垫有湿润定性滤纸的培养皿(?9 cm)中。同样地逐个计数发育卵的卵块数、卵粒数、未孵化卵粒数,统计单个雌蛾的产卵量、卵块数量和计算卵孵化率。 2 卵粒及卵块的采集 实验结果表明:二化螟在塑料袋收集卵块的条件下每个雌蛾产卵的平均卵块数为6.8块,显著地高于在鲜稻苗上的(表1)。但从卵块大小来看,用塑料袋收集的二化螟卵块中,低于100粒卵的小卵块较多,而用稻苗法收集的卵块大于100粒卵的明显较多(图2)。二化螟在2种卵块收集法中的每雌产卵量及卵孵化率都没有明显差异,均达到了279粒左右和95%左右(表1)。用塑料袋法收集的二化螟卵粒最高可达831粒/雌蛾。这些表明二化螟雌蛾在塑料袋中的产卵及卵的孵化与在稻苗上基本相同,其产卵量不受影响,可获得与稻株法相同数量的虫源。采用塑料袋法收集的二化螟卵块偏小,可能与塑料膜表面平滑或没有产卵诱导物质有关。但从另一角度来说,卵粒在20～50个的较小卵块很适合应用于转基因水稻抗螟性人工接虫田间鉴定。因此,塑料袋法收集二化螟卵块具有以下一些优点:(1)高效。二化螟在有限的空间里产卵,减少了采集卵块所需的时间;(2) 简便。收集卵块所需的设备和材料非常简单,操作也十分方便;(3)培养皿中观察卵的发育进度也很容易。 作者还采用塑料袋法分别收集了三化螟和稻纵卷叶螟的卵,均获得了良好的效果。三化螟卵块表面覆盖有厚厚的褐色绒毛,在稻叶上的卵块不容易观察其卵发育进度,给人工接虫带来一定的难度;而稻纵卷叶螟的卵是散产的,采用塑料袋收集其卵,更易集中收集,便于保存。有关塑料袋卵块收集法是否适用于其他鳞翅目昆虫(如小菜蛾、甜菜夜蛾等)的卵块收集等问题,将有待进一步试验、证实。