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外源性肺表面活性物质对胎粪吸入鼠肺功能的影响 肺表面活性剂（ps）对新生儿呼吸急促综合征的治疗有效。在原则上,任何肺疾病干扰了内源性PS系统就有可能成为PS治疗的适应证。胎粪吸入综合征(meconium aspiration syndrome,MAS)是由于胎儿发生宫内窘迫或产时窒息排出胎粪,吸入后发生肺部病变所致。内源性PS失活是吸入胎粪后导致呼吸衰竭的重要原因之一。本实验旨在探讨外源性PS对胎粪吸入大鼠肺功能的影响。 动物的分离和测定 PS由本院麻醉科根据Kobayashi等的方法自制。用生理盐水灌洗新鲜猪肺,离心灌洗液以除去细胞碎片、水溶性蛋白和中性脂质。然后用氯仿/甲醇(容量比2:1)提取,丙酮沉淀后冻干而成。主要成分包括约98%的磷脂、1%的脂肪酸和中性脂质和1%疏水性相关蛋白B和C,不含有亲水性相关蛋白A和D。将PS溶解于生理盐水中备用。收集10名健康足月新生儿的胎粪,溶解于生理盐水中配制成200 mg/ml的溶液。 Wistar大鼠雌雄不拘,腹腔注射戊巴比妥钠30 mg/kg麻醉后行气管切开插管,行股动静脉穿刺插管以便采血输液用。与小动物用呼吸机相连进行机械通气,吸气峰压(PIP)为16 cm H2O,呼气末正压(PEEP)为0 cmi H2O,I:E为1:1,呼吸次数为40次/min,吸入氧浓度为100%。通气30 min后,采血进行血气分析。向气道内注入3 ml/kg配制好的胎粪溶液,同时调节PIP和PEEP分别为25 cm H2O和5 cm H2O。15～30 min后测血气,动脉血氧分压(PaO2)降至20 kPa(1 kPa=7.5 mm Hg)以下为模型建立。若未达到此值,追加1 ml/kg胎粪溶液。然后将动物随机分为四组(每组7例):A组,气道内注入PS 150 mg/kg (50 mg/ml,3 ml/kg);B组,气道内注入等量生理盐水;C组,用PS稀溶液75 mg/kg (5 mg/ml,15 ml/kg)进行支气管肺泡灌洗,重复2次;D组,用15 ml/kg的生理盐水灌洗双肺,方法与C组相同。治疗后15 min、30 min、60 min、120 min、180 min采血测定血气。180 min后测定各组动物潮气量。用40ml/kg生理盐水灌洗双肺,将灌洗液150 g离心10min后取上清于-30℃冰箱中保存待测。检测项目包括总蛋白(TP)和肿瘤坏死因子-。(TNF-α)含量。TNF-α的测定使用放免法。 测定结果用平均数±标准差)表示,用StatView 5.0软件包的ANOVA进行分析,组间和组内用多重比较。P0.05为差异有显著性。 paco2的变化 各组体重无显著差异(表1)。注入胎粪前各组PaO2为(57±6)kPa,组间差异无显著性。注入胎粪后PaO2降至(13±2) kPa,组间差异无显著性。治疗后A和C组PaO2明显升高,B和D组PaO2未发生明显变化(见图1)。A和C组治疗后的PaO2与治疗前、B组、D组相比差异有显著性(P0.05)。A和C组之间差异无显著性。PaCO2的变化见图2,A和(C组治疗30 min后的PaCO2与治疗前、B组、D组相比差异有显著性(P0.05)。 治疗后3h各组潮气量见表1。A、C组与B、D组之间差异有显著性(P0.05)。BAL液中的TP和TNF-α含量见表1。PS治疗组即A、C组TP含量明显低于B、D组(P0.05)。C组与A组差异无显著性。各组BAL液中TNF-α含量差异无显著性。 ps治疗胎粪污染的作用 MAS的严重程度与宫内窘迫的程度和吸入胎粪的量有关。严重MAS的临床特征是进行性呼吸窘迫、高碳酸血症、低氧血症和酸中毒,需要长时间机械通气治疗。吸入胎粪引起复杂的病理生理变化,粘稠的胎粪颗粒阻塞气道并损伤肺泡上皮,引起肺不张、化学性肺炎、肺血管收缩和血浆蛋白渗出等。此外,胎粪中的一些成分,例如胆固醇等干扰PS的功能。胎粪还干扰肺泡Ⅱ型细胞对PS的摄取和再循环以及胎粪中的酶引起PS磷脂和蛋白质的降解。由此可以推论,增加肺泡内的PS池容积(pool size)可以拮抗胎粪和渗出蛋白的抑制作用,本实验中PS治疗明显改善胎粪吸入大鼠的气体交换和肺顺应性,减少蛋白渗出。 本实验的结果表明使用75 mg/kg PS稀溶液的灌洗法和使用150 mg/kg PS的气道注入法对于改善肺功能可以取得同样的效果,说明灌洗法优于气道直接注入法。其原因可能是用稀释的PS溶液可以清除相当一部分粘着在气道内的胎粪,且可以帮助清除细胞降解产物、细菌、蛋白等,有利于改善PS功能和通气,有利于PS均匀分布。 有研究认为在PS给药方式中,灌洗法是最具有侵袭性的,因为灌洗过程中动物完全脱离呼吸机,有接近2 min的窒息时间。本实验灌洗法的容量较大为15 ml/kg,约相当