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2022/12/7 卒中治疗药物或治疗方法临床前评价的动物模型中国卒中学会转化医学分会(发布时间：2017-08) 卒中治疗药物或治疗方法临床前评价的动物模型 中国卒中学会转化医学分会(发布时间：2017-08) 卒中是由各种血管性因素(包括出血和缺血)引起的急性脑功能障碍。卒中具有高发生率、高死亡率、高致残率等特点，给社会和家庭带来沉重负担。然而，大量临床前动物模型上有效的治疗药物， 在临床试验中均未得到阳性结果。虽然原因是复杂的，但动物模型制备的技术成熟度、模型的标准化、多样性、与临床的相关性、评价指标的选择、实验条件的控制，以及未遵循多中心随机双盲 原则等，都可能导致临床前与临床试验结果的不一致。鉴于此，中国卒中学会转化医学分会经过长期酝酿和多次深入讨论，决定撰写本文，并建议作为卒中临床前药物和治疗方法评价的指南，希 望能推动我国卒中临床前研究的临床转化。 1 卒中动物模型的选择与临床意义 卒中一般分为两大类，一类为出血性卒中，另一类是缺血性卒中，分别需要用脑出血动物模型和脑缺血动物模型进行临床前评价。脑出血动物模型一般采用自体血脑内注射模型，注射部位和注射 量可根据研究目标而定。临床上缺血性卒中的梗死体积变异较大，至少需要一种能反映体积较大的梗死灶的动物模型和一种能反映体积较小的梗死灶的动物模型。大鼠颈内动脉线栓法制备大脑中 动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)往往形成较大的梗死体积，可用于评价梗死灶较大的缺血性卒中。光化学法诱导脑缺血模型形成的梗死灶较小，并且可以人为控制梗死灶体 积和梗死发生的位置，因此适合于评价梗死灶较小的缺血性改变。无论线栓模型还是光化学法诱导脑缺血模型，都和临床实际的脑缺血有较大差异。因此，在评价治疗药物或治疗方法对缺血性卒 中的作用时，最好另加一个大鼠同种异体血栓栓塞模型，这种模型与临床脑血栓形成比较接近。近年来，临床上血管内溶栓或介入取栓的病例越来越多，这会导致缺血再灌注。 此外，还有些患者出现自发再灌注。因此，在评价治疗药物或治疗方法对缺血性卒中的作用时，应采用永久性缺血和缺血再灌注两种模型。因各种原因导致在一段时间内大脑中断血供，比如心脏 手术等，可导致全脑缺血再灌注损伤，评价治疗药物或治疗方法对这种缺血性卒中的作用时，最好采用大鼠四血管结扎缺血再灌注模型。此外，选择动物模型时还要注意性别和年龄问题，至少有 一种卒中模型分别使用雄性和雌性动物，至少有一种卒中模型使用老年大鼠。当然，临床上卒中的类型多种多样，不可能一一用动物模型复制，上述几种动物模型基本可以覆盖卒中的大部分情况 [1] 。 2 主要卒中动物模型的制备方法及评价指标 2.1 线栓法大鼠局灶性脑缺血模型(永久性和再灌注) 一般采用MCAO模型[2]。实际上，并非所有的缺血都发生在大脑中动脉(middle cerebral artery，MCA)，但MCAO比较容易复制，实验条件也比较容易控制，个体之间的可比性较好，建议首选 该模型。 2.1.1 制备方法 2.1.1.1 手术过程 将麻醉后的大鼠仰卧位固定于手术台上，剪去颈部毛发，75%酒精、碘伏消毒颈部皮肤，颈部正中切开，用眼科镊轻轻分开表面筋膜，分离右侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉， 钝性分离甲状腺动脉和枕动脉并电凝切断。手术过程应尽量避免刺激气管和神经。用动脉夹夹闭颈总动脉近心端和颈内动脉，防止出血。颈外动脉近心端和远心端分别用缝线(6-0)结扎，近心端的 缝线此时不扎紧，在两个缝线间剪一微小切口，插入线栓，稍系紧颈外动脉近心端的结并剪断颈外动脉。松开颈内动脉上的动脉夹，将插入的线栓翻折经颈总动脉分叉进入颈内动脉，然后徐徐插 入至有轻微阻力为止(进入的线栓自分叉处至MCA起始端约20mm)，阻断MCA的所有血供并再次系紧颈外动脉的缝线固定线栓，松开结扎颈总动脉的动脉夹。如研究永久性缺血，线栓插入后，剪 172.19.66.122:10000/content/html/print.htm?randnumber=0.8639379479116005 1/10 2022/12/7 卒中治疗药物或治疗方法临床前评价的动物模型中国卒中学会转化