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百合病毒病的发生与防治

1百合的观赏价值

百合是百合花科的一种多年生多年生植物。它是国际上最重要的玫瑰观赏花卉之一。我国百合除传统药用、食用和提取香精外,其切花观赏价值正日益受到重视,栽培面积不断扩大。在生产上百合主要靠扦插繁殖和分球繁殖等方式繁殖,长期的无性繁殖使病毒在体内积累,引发病毒病,严重影响果实的产量和品质以及花和叶等的观赏价值。随着百合栽培面积的不断扩大,病毒病的危害越来越严重。

自Stewart(1896)描述百合的坏死条纹以来,相继报道了百合的病毒病原14种。其中发生普遍,危害严重的病毒有5种,即百合潜隐病毒(Lilysymptomlessvirus,LSV)、黄瓜花叶病毒(Cucumbermosaicvirus,CMV)、郁金香碎花病毒(Tulipbreakingvirus,TBV),异名百合斑驳病毒(Lilymottlevirus,LMoV)和百合丛簇病毒(Lilyrosettevirus,LRV);其他9种病毒均在栽培地区少量发生,对百合构不成普遍危害,如百合X病毒(LilyvirusX,LVX)、百合环斑病毒(Lilyringspotvirus,LRSV)、水仙花病毒(Narcissusmosaicvirus,NMV)和烟草环斑病毒(Tobaccoringspotvirus,TRSV)等。

2百合茎尖脱毒研究

植物病毒主要是通过植物营养体无性繁殖传播的。无性繁殖方式的优点在于能保持其后代遗传基础的一致,较少发生变异。然而长期的无性繁殖将会使体内逐渐积累大量病毒致使植物发生病毒病,并导致种性退化。百合也不例外,病毒病经常对百合生产造成严重危害。由于百合的快速繁殖技术也属于无性繁殖,所以阻断病毒从母株向后代的传播,获得脱毒苗也是百合毓的关键所在。开展百合脱毒研究最早是Phillips(1962年),他利用百合茎尖培养脱毒成功以后,先后又有许多外国学者利用茎尖脱毒成功。目前国际上有几个国家利用这种方法获得百合无病毒苗,并在生产上大规模应用。茎尖脱毒培养的两个关键技术环节是茎尖的成活率和脱毒率。茎尖培养成活率低。褐化是降低茎尖培养成活率的首要因素。褐化的发生与许多因素有关,茎尖大小、取材季节、培养方式、激素浓度、基本培养基、培养基添加物都对茎尖褐化有影响,例如茎尖越小褐化越严重成活率越低在茎尖培养时为抑制褐化的发生需要优化上述各因子应用抗氧化剂AC和Vc也可有效抑制茎尖培养的褐化现象。阻断病毒传播获得脱毒苗的基本方法有:茎尖培养、珠芽培养、化学处理和热处理。

2.1植物茎尖中病毒的复壮

茎尖培养是由于病毒在患病的植株上分布不均匀,在较老的器官和组织内病毒含量较高,在幼嫩的或未成熟的组织和器官中病毒的含量较低。茎尖是植株中最年轻,细胞分裂最活跃的部位,病毒一般通过维管束转移,茎尖分生组织没有维管束,病毒只能通过胞间连丝传递,赶不上细胞分裂和生长的速度,所以它几乎不含或很少含病毒,植物茎尖中无毒生长点培养成了去除植物中病毒使植物复壮的重要方法。

珠芽培养时先剥掉外部鳞片,把带有叶原基的珠芽生长点经消毒,无菌水冲洗数次后,剥掉部分叶原基,最后将带有1～2个叶原基的生长点在解剖镜下切成0.3～1.2mm不同长度小段进行培养。赵祥云等实验表明,利用0.3～0.8mm珠芽生长点对淡黄花百合进行离体培养,通过脱分化产生愈伤组织,然后将愈伤组织再分化成芽,最后培育出的幼苗可成功地脱去烟草环斑病毒。

2.2百合病毒病毒传播途径

抑制植物病毒的活性化学物质包括代谢拮抗物质、植物生长调节物质等。其中一些已用于植物脱毒研究。病毒唑是广谱性抗病毒药物,国外在20世纪70年代末和80年代初,国外一些科学家将这种抗动物病毒的药物应用于植物,成功地脱去了马铃薯X病毒、黄瓜花叶病毒和苜蓿花叶病毒等。在百合生产上,采用矿物油、植物油、杀虫剂和外激素喷洒,可控制百合病毒病蔓延。也可采用矿物油和拟除虫菊酯杀虫剂混合物进行喷洒控制百合蚜虫传播的百合潜隐病毒和百合斑驳病毒。然而目前尚未见到化学药物应用于百合脱毒研究的报道。

热处理依据是在高温下病毒出现钝化,其复制明显减弱或不再繁殖。将植物在高温下培养数周至数月,这个期间生长的嫩稍不带病毒。植株的存活率和脱毒率受温度的高低和持续时间长短的影响。大部分百合病毒在50～65℃之间活性稳定,所以处理温度在65～75℃之间,才能钝化病毒。然而温度过高,会降低植株的成活率。在实践中,利用较高温度处理时,缩短处理时间,温度较低时适当延长处理时间。

3脱毒的检测方法

采用各种方法获得的脱毒苗,必须经过严格的检测确定脱毒才能推广应用。目前常用的检测方法有指示植物法、电镜技术、酶联免疫技术和分子生物学技术等。

3.1百合病毒检测方法

百合病毒检测的基本手段是指示植物法。