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茯苓多糖提取工艺优化及其药理作用研究

椰子茯苓是一种常见的中药。据记载，它是《神农本草经》记载的优质产品。性味甘淡,平,归入心脾肺经。具有祛湿利水、健脾和胃、宁心安神的作用,用于治疗小便不利,水肿胀满,痰饮咳逆,呕秽,泄泻,遗精,淋浊,惊悸,健忘等。是多种方剂及中成药的原料,有“十药九茯苓”之说。茯苓在中医临床及人们生活中有着广泛的应用价值,近些年来,国内外对茯苓的化学成分做了很多研究,尤其是茯苓多糖,并且取得了较大的研究进展。本文对近10年来茯苓多糖提取方法和药理作用方面的研究进行综述。

1椰子茯苓提取方法

1.1茯苓多糖的提取

茯苓多糖的提取方法很多,试验表明茯苓多糖可根据溶解度不同分为水溶性茯苓多糖和碱溶性茯苓多糖。赵声兰等利用单因素实验优化茯苓皮中茯苓多糖的稀碱提取方法,在单因素实验的基础上利用响应表面实验设计考察碱法提取过程中碱浓度、提取时间、料液比对多糖提取量的影响,所得最佳提取工艺条件为:NaOH浓度为0.84mol·L-1,提取时间为8.89h,料液比为1∶150。此条件下茯苓皮中多糖提取量达到54.99%。高杰等采用稀碱提取茯苓多糖,在用二甲基亚砜(DMSO)对碱液提取的粗多糖进行精制。邱绿琴等采用茯苓粗粉分别用乙醚、丙酮在索式提取器中回流脱脂4h,残渣用0.9%NaCl溶液浸泡,过夜。离心,得上清液,浓缩3倍,用95%乙醇沉淀,沉淀物加入100℃的热水中提取30min,离心,沉淀物再用0.5mol·L-1NaOH在4℃提取,得胶状提取液,4℃冰箱过夜,离心,取上清液用10%乙酸沉淀,再用蒸馏水洗涤,干燥,用Sevag法除去蛋白质和透析法纯化,精制,既得茯苓多糖。

1.2粗多糖浸提工艺参数对多糖得率的影响

多糖类传统提取方法为水提醇沉法,但是茯苓多糖中水溶性多糖的含量很少,所以该方法现已少用。屈贺幂研究了茯苓多糖水提工艺,主要考虑了浸提水溶液温度、料水比和浸提时间对多糖得率的影响,首先进行单因素试验,确定单因素的水平范围,并在此基础上采用正交实验进行分析,以获得最佳的粗多糖浸提工艺参数。然后采用中心组合设计进行放大试验,经统计回归分析得到茯苓粗多糖的优化提取工艺参数:料水比为1∶9.4,浸提温度90℃,沉淀时酒精浓度70%,提取时间7.4h左右。

1.3水浸法提取茯苓多糖的可行性

超声提取法是近年来利用外场介入强化中草药有效成分提取分离的一种技术。超声波是一种弹性机械振动波,具有高速、强烈振动及空化效应等作用。因此能破坏植物药材的细胞,使溶媒渗透到药材细胞中,从而加速药材中的有效成分溶解,以提高有效成分的提取率。王博通过试验得到超声波辅助热水浸提水溶性茯苓多糖的最佳提取工艺,以多糖得率为指标,在单因素试验的基础上采用正交试验得出了超声波提取水溶性茯苓多糖的最佳工艺条件,即超声时间25min、提取温度80℃、液固比60,并与传统热水浸提法进行比较;同时用环境扫描电子显微镜对超声波处理前后茯苓菌核细胞结构的变化情况进行研究,结果发现未经超声处理的茯苓菌核细胞整体比较完整,表面儿乎没有裂纹,不同细胞间通过胞间层连接在一起。经25min超声处理后,多数茯苓菌核细胞上都出现不同程度的裂痕,有的细胞甚至已经完全崩溃,大多数胞间层也已经被破坏。同时也比较了传统碱提法和超声波辅助碱提法分别对超声辅助热水浸提所得茯苓残渣进行提取,得碱溶性茯苓多糖,得率分别76.47%、85.4%。由此可以得出超声辐射强化浸提缩短了提取时间,提高了碱溶性茯苓多糖的提取效率。赵子剑用0.5%的NaOH溶液为溶媒采用正交实验方法对茯苓多糖的加热及超声提取工艺进行优化,从中得到最佳茯苓多糖的提取方案。并且通过采用均匀设计试验优选超声提取茯苓多糖的工艺参数,最后得到最佳提取工艺条件为:溶剂70%的乙醇,料液比为1∶10,温度为25℃,提取时间为20min。为探讨提取过程中时间、温度、碱浓度、浸提次数对茯苓皮中茯苓多糖提取量的影响,程水明等在提取单因素试验的基础上,利用正交设计优化茯苓皮中茯苓多糖的最佳浸提工艺条件。结果表明,水提法最佳工艺条件为时间30min,温度60℃,浸提1次;超声波提取法最佳工艺条件为功率350W,时间30min,水温60℃。水提、碱提和超声波提取3种方法中以0.8mol·L-1NaOH浸提的碱提法效果最好。霍文采用了超声波提取法提取茯苓多糖,并用正交试验法对提取过程中药材粒度,超声时间,用水量进行了优化研究,最后得到最佳提取条件为粒度20目,超声时间20min,用水量40mL。

1.4茯苓多糖的提取

微波技术作为一项新的药物制备提取方