远隔缺血后处理时间晚清对大白兔心肌缺血再灌注损伤保护作用的影响.docxVIP

远隔缺血后处理时间晚清对大白兔心肌缺血再灌注损伤保护作用的影响

可能的致死于人类健康的疾病可能是由于缺血和再灌注过程。近年来,有研究证实,心肌缺血期进行短暂肢体缺血/再灌注处理同样可以达到保护心肌的目的。由于缺血/再灌注方案不同,其结果也大不相同。本文旨在研究远隔(下肢)缺血后处理时间长短对兔心肌缺血/再灌注损伤保护作用的影响,并探讨其相关性,为临床心肌缺血事件发生后心肌保护提供资料。

1实验动物及检测指标

1.1材料(1)实验动物:健康的新西兰兔54只,体质量3.0~3.5kg,由江西中医学院动物实验中心提供。(2)主要实验仪器、试剂盒:LANDMARKAG-Ⅱ全自动生化分析仪,心电监测仪购自华南医电公司;离心机(TGL-168)购自上海安亭科学仪器厂,生化检测试剂盒购自美国RD公司。麻醉用相关药品为氯胺酮、甲苯塞嗪、硫喷妥钠、阿托品。

1.2方法

1.2.1模型建立采用Selye法结扎兔心脏冠状动脉左前降支(LAD),制作急性心肌梗死(AMI)模型。以结扎冠状动脉远端心肌心电图在30min内ST段、T段进行性抬高,结扎以下的心肌颜色变暗、心肌运动减弱为LAD成功结扎标志。

1.2.2动物分组及处理实验动物分6组:假手术组(n=4)和A组、2次缺血5min/灌注5min组(B组)、3次缺血10min/灌注5min组(C组)、4次缺血5min/灌注5min组(D组)、4次缺血10min/灌注5min组(E组)5组各10只。处理措施如下:假手术组只穿线,不夹闭LAD;A组在夹闭LAD30min后,开放LAD实施再灌注6h;B组在夹闭LAD30min后,开放LAD同时夹闭双下肢动脉5min,然后开放5min,重复缺血/再灌注,共2个循环,实施再灌注6h;C夹闭双下肢动脉时间为10min,3个循环缺血/再灌注;D组夹闭双下肢动脉时间分别为5min、4个循环缺血/再灌注;E组夹闭双下肢动脉时间分别为10min、4个循环缺血/再灌注。

1.2.3检测指标(1)室性心律失常:记录缺血期及再灌注期室性心律失常发生类型,并对其评分。0分,无心律失常;1分,偶发室性早搏(1min3次);2分,频发室性早搏(1min≥3次);3分,偶发室性心动过速(1min3次);4分,频发室性心动过速(1min≥3次);5分,频发室性颤动(1min≥3次)或死亡。(2)生化指标:分别于缺血期及再灌注后3、6h抽取动脉血5mL,4℃下4000r/min离心10min,取上清液,-80℃保存,采用全自动生化分析仪测定血浆肌钙蛋白(cTnT)的水平。(3)心肌梗死面积:以cTnT总释放量曲线下面积作为心肌梗死面积的代指标。(4)远隔缺血后处理时间(即每次时间×次数)与室性心律失常、cTnT的水平、心肌梗死面积相关性。

1.3统计学处理采用SPSS10.0统计软件进行分析,多组间均数比较用方差分析,q检验法;用多元回归方法分析相关性,相关系数用r表示。计量资料以xˉ±sxˉ±s表示,以P0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1再灌注室性心律失常评分

室性心律失常主要发生于缺血及再灌注后前30min内,其评分结果见图1。假手术组实验前后无变化;在再灌注后0~30min,B、D组与A组比较,再灌注室性心律失常评分差异无统计学意义(P0.05);C、E组与A、B、D组比较差异有统计学意义(P0.01)。再灌注31~60min,E组与A、B、C、D组比较,再灌注室性心律失常评分差异有统计学意义(P0.01),A、B、C、D组无差异。此后各组间室性心律失常评分比较差异无统计学意义(P0.05)。且心律失常评分与缺血后处理时间呈负相关(r=-0.892)。

2.2组大鼠血清中b、c、d组的下降

假手术组实验前后无变化;与A组比较,B、C、D、E组下降显著(P0.05)。与B、C、D组比较,E组下降显著(P0.05),见表1。且cTnT水平与缺血后处理时间呈负相关(r=-0.833)。

2.3组大鼠血清中b、d、d组的下降情况

以cTnT总释放量曲线表示,见图2。假手术组无心肌梗死;与A组比较,B组下降32.3%,C组下降32.8%,D组下降31.0%,E组下降35.8%。且心肌梗死面积与缺血后处理时间呈负相关(r=-0.782)。

3再灌注对我国远隔活检的影响

随着冠状动脉再血管化介入(PCI)治疗方法、冠状动脉搭桥术(CABG)、瓣膜置换术等技术推广应用,再灌注损伤造成心肌损伤已被临床医生所认识和关注。探索激发机体内源性保护机制减轻缺血及再灌注损伤成为心血管领域的研究热点。

2003年Zhao等首次发现后适应在限制梗死范围及保护缺血后的内皮功能方面与缺血预适应有相同效果,并提出缺血