1.2.2 微生物的选择培养和计数课件高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

第1章发酵工程1.2.2微生物的选择培养和计数温故知新：酵母菌的纯培养选择培养基应运而生①配制培养基（马铃薯、葡萄糖、琼脂、水）培养基：湿热灭菌（高压蒸汽灭菌锅）1.制备培养基②灭菌酵母菌的纯培养培养皿：干热灭菌（干热灭菌锅）③倒平板（在酒精灯火焰附近操作）用接种环在固体培养基上用平板划线法接种2.接种和分离酵母菌平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱培养3.培养酵母菌问题1：自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。该怎么办呢？从社会中来美国黄石公园课本P16科学实例：寻找耐高温的DNA聚合酶聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外扩增DNA片段的技术，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。1966年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的水生栖热菌(Taq酶)，并分离到耐高温的DNA聚合酶。1.筛选水生栖热菌的思路是什么样的？高温环境（热泉、火山口）耐高温的酶耐高温生物体2.为什么水生栖热菌能从热泉中筛选出来呢？寻找寻找筛选原因：水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找启示：根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。问题2：这对在实验室中选择培养特定的微生物有什么启示？如何筛选？什么是选择培养基？耐寒微生物耐热微生物石油分解菌选择培养基课本P161.实验室中微生物筛选的原理：有利于目的菌生长营养温度人为提供的条件（包括、_____和等），同时。pH抑制或阻止其他微生物的生长2.选择培养基的概念：特定种类的微生物抑制在微生物学中，将允许生长，同时_____或其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。阻止选择培养基培养基中加A毒素培养基原有菌落没有A毒素抗性的细菌被淘汰具有A毒素抗性的菌落没有A毒素抗性的细菌允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基怎样选择出抗A毒素能力的细菌?选择培养基（1）目的：分离酵母菌、霉菌等真菌，防止细菌生长原理：青霉素能抑制细菌生长，对真菌无作用配制：使用____________的培养基（2）目的：分离固氮菌原理：固氮微生物能利用空气中的氮气配制：使用_______________________的培养基（3）目的：分离自养型微生物原理：自养型微生物能利用无机碳源配制：使用___________________________的培养基（4）目的：分离耐酸菌原理：耐酸菌能在pH为酸性的条件下生长配制：使用_______________的培养基应用允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基加入青霉素不加氮源（以N2为氮源）不加有机碳源（以CO2为碳源）将pH调至酸性选择培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。2.概念:类型条件分离得到的菌种改变培养条件70～80℃的高温添加某种化学物质加入青霉素高浓度食盐特殊碳、氮源石油是唯一碳源营养缺陷不加碳源不加氮源3.类型:水生栖热菌酵母菌、霉菌等真菌金黄色葡萄球菌能消除石油污染的微生物自养型微生物固氮菌选择培养基配方的设计尿素尿素[CO（NH2）2]含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，NH3再转化成NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可作为细菌生长的氮源。脲酶CO2CO（NH2）2+2NH3+H2O转化NH4+NO3-问题3：如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？选择培养基配方的设计培养基:培养可以分解尿素的细菌KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g蒸馏水定容到1000ml(1)分离分解尿素的细菌的选择培养基是如何进行选择的？该选择培养基的配方中，尿素是培养基中的唯一氮源，因此，只有能够利用尿素的微生物才能够生长。(2)为什么只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长？分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可催化尿素分解产生NH3，NH3可作为微生物生长的氮源。思考分析如何判断选择培养基是否有杂菌污染以及选择培养基是否能筛选出一些菌落(即选择培养基是否具有选择性)？①如果没有接种的选择培养基上没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。②如果接种后的完全培养基(或基本培养基→牛肉膏蛋白胨)上的菌落数明显多于接种后的选择