SNT 2426-2010进出口粮谷中梅毒含量检测方法液相色谱法.docxVIP

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T2426—2010

进出口粮谷中桔霉素含量检测方法

液相色谱法

Determinationofcitrinincontentsincerealsforimportandexport—

HPLCmethod

2010-01-10发布

2010-07-16实施

中华人民共。和、国发布国家质量监督检验检疫总局

I

SN/T2426—2010

前言

本标准的附录A为资料性附录。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国湖北出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：林雁飞、赵晓亚、胡小钟、王鹏、李晶、付晓芳。

本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。

1

SN/T2426—2010

进出口粮谷中桔霉素含量检测方法

液相色谱法

1范围

本标准规定了进出口粮谷中桔霉素含量液相色谱检测方法。

本标准适用于进出口大米、大麦、燕麦、小麦中桔霉素含量的检测。

2方法提要

用乙腈-异丙醇-水的混合溶液提取试样中桔霉素，Cia固相萃取小柱净化，用配荧光检测器的液相色谱仪测定，外标法定量。

3试剂和材料

除另有规定外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水或相当纯度的水。

3.1异丙醇：色谱纯。

3.2乙腈：色谱纯。

3.3磷酸：优级纯。

3.4提取溶剂：乙腈-异丙醇-水(35+10+55,体积比),用磷酸调pH为1.5。

3.5磷酸溶液：取5.6mL磷酸，以水定容至1000mL。

3.6流动相：乙腈-异丙醇-0.08mol/L磷酸(35+10+55,体积比)。

3.7C?固相萃取柱：500mg,3mL,或相当者。使用前分别用5mL甲醇和5mL水预淋洗并保持柱体湿润。

3.8桔霉素标准物质(citrinin,Ci?H?O?,CAS编号：518-75-2):纯度大于等于97%。

3.9桔霉素标准储备液：称取适量桔霉素标准物质，用乙腈溶解并定容至1.0mg/mL,0℃~4℃

保存。

3.10桔霉素标准工作液：根据需要用流动相将标准储备液稀释成25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL的标准工作溶液。

3.11玻璃纤维滤纸：直径11cm,孔径1.5μm。

4仪器和设备

4.1高效液相色谱仪：配有荧光检测器。

4.2振荡器。

4.3离心机：4000r/min。

4.4真空固相萃取装置。

4.5氮吹仪。

4.6分析天平。

5试样制备和保存

取有代表性样品500g,用粉碎机粉碎并通过830μm圆孔筛，混匀，分成两份，装入洁净容器内，密

封并标识。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

2

SN/T2426—2010

6测定步骤

6.1提取

称取试样约5g(精确至0.01g)于50mL离心管中，加10mL提取溶剂(3.4),在振荡器上振荡提取30min。于3500r/min离心4min,上清液转入另一离心管中。在残渣中再加入5mL提取溶剂(3.4),重复上述操作，合并上清液。在提取液中加水至40mL,并用磷酸调pH为1.5,过玻璃纤维滤纸

(3.11),待净化。

6.2净化

将上述溶液过预淋洗好的C?固相萃取柱，用5mL水淋洗柱子。待淋洗液全部流出柱子后，减压

抽干3min。用10mL甲醇以1.0mL/mm的速度洗脱，收集全部洗脱液，在40℃下，N?吹干，再以

1.0mL流动相溶解，过0.2μm滤膜，供液相色谱测定。

6.3测定

6.3.1液相色谱条件

a)色谱柱：C柱，250mm×4.6mm(内径),粒径5μm,或相当者；

b)流动相：乙腈-异丙醇-0.08mol/I磷酸(35+10±55,体积比);

c),流速：1.0mL/min;

d)进样量：50pL;

e)柱温：28℃;

f)检测波长：Ex=331nm,Em=500nm。

6.3.2色谱测定

根据样液中被测桔霉素含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作液和样液中桔霉素

响应值均应在仪器检测线性范围内、对标准工作波和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，

桔霉素保留时间约为9.1min,标准物质色谱图参见附录A中图A.1)

6.3.3空白试验

除不加试样外，均按上述操作步骤进行。

7结果计算和表述

x-4用色谱数据处理软件或按式(1)计算试样中桔霉素含量，计算