高中生物___检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质.pptVIP

关于高中生物___检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质实验：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。化学试剂+有机化合物→特定的颜色①还原糖+斐林试剂砖红色沉淀②脂肪+苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液→橘黄色（或红色）③蛋白质+双缩脲试剂→紫色④淀粉+碘→蓝色水浴加热第2页,共30页，2024年2月25日，星期天斐林试剂与双缩脲试剂的比较斐林试剂用的是甲液和乙液，须现配现用，混合均匀，水浴加热。双缩脲试剂用的是A液和B液，先加A液，后滴B液，不用水浴加热。第3页,共30页，2024年2月25日，星期天第4页,共30页，2024年2月25日，星期天双缩脲反应：含有两个或两个以上肽键的化合物与碱性硫酸铜作用，生成蓝紫色的复合物第5页,共30页，2024年2月25日，星期天斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成，但二者有如下三点不同：①溶液浓度不同。斐林试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL，CuSO4的浓度为0.05g/mL；双缩脲试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL，CuSO4的浓度为0.01g/mL。②使用原理不同。斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液；双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2＋。③使用方法不同。使用斐林试剂时，先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合，然后立即使用。使用双缩脲试剂时，先加入NaOH溶液，然后再加入CuSO4溶液。第6页,共30页，2024年2月25日，星期天第7页,共30页，2024年2月25日，星期天一、可溶性还原糖的检测：（1）原理：还原糖+斐林试剂砖红色沉淀。（2）选材：苹果、梨、白萝卜。含糖量较高，颜色为白色或近于白色的植物组织。（3）检测过程：水浴加热振荡混匀50～65℃水浴加热2min2mL组织样液刚配制的斐林试剂2mL呈现浅蓝色变成砖红色（Cu2O）还原糖：含有半缩醛羟基的糖类，主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。第8页,共30页，2024年2月25日，星期天当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后，立即生成淡蓝色的Cu（OH）2悬浊液。Cu（OH）2与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。因此，利用该反应，可证明样液中含可溶性还原糖。R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O甲液乙液等量混合，现用现配，切不可分开滴加，或者久置后才用。第9页,共30页，2024年2月25日，星期天制备组织样液梨或苹果研磨取5g，放入研钵中洗净、去皮、切块过滤滤液（用单层纱布）显色反应向试管中加入2ml组织样液向试管中加入2ml新配制的斐林试剂或本尼迪特试剂振荡混匀50～65℃水浴加热2min观察现象观察溶液颜色变化：浅蓝色→棕色→砖红色结论：生成砖红色沉淀，说明梨或苹果中含有还原糖。砖红色的糖（还原糖）非（斐林试剂）常好吃第10页,共30页，2024年2月25日，星期天2ml组织样液1ml新配制的斐林试剂50?65℃水浴加热约2min观察颜色变化砖红色浅蓝色棕色【斐林试剂】：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液，使用前等体积混合均匀（生成浅蓝色的Cu（OH）2悬浊液），现配现用（时间一长，Cu（OH）2沉淀在溶液底部无法发生反应。且需要水浴加热。第11页,共30页，2024年2月25日，星期天还原糖的检测结果斐林试剂与可溶性还原糖在水浴热的条件下，生成砖红色的Cu2O沉淀。-CHO+Cu(OH)2悬浊液-COOH+Cu2O↓（砖红色）第12页,共30页，2024年2月25日，星期天二、脂肪的检测（1）选材：经浸泡去种皮的花生种子。（2）检测过程：制片选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央制成临时装片：滴1?2滴蒸馏水，盖上盖玻片染色：在薄片上滴加2?3滴苏丹Ⅲ染液，染色2?3min洗去浮色：用吸水纸吸去染液，滴加体积分数为50%的酒精1?2滴镜检观察：在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。苏三（苏丹Ⅲ）送了我一个橘黄色的胭脂（脂肪）切片：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片。视野中有橘黄色颗粒第13页,共30页，2024年2月25日，星期天橘黄色小圆颗粒即为脂肪颗粒脂肪+苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液橘黄色（或红色）第14页,共30页，2024年2月25日