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母羊地方流行性流产补体结合试验操作规程

成分

被检血清

各项对照

试验管

抗补体

对照

阳性

血清

阴性血清

抗原

对照

溶血幸

生理

盐水

效份

1:4

1:8

1:16

1:32

1:64

1:128

1:4

2个工作量

1:4

2个工作量

血清

0.1

0.1

0.1

0.1

0.I

0.1

0.1

0.1

0.1

2工作量抗原

0.1

0.1

0.1

0.1

0.I

0.1

0.1

0.1

0.1

2单位

补体

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

生理盐本

0.1

0.1

0.2

0.4

视匀，4℃16h~18h感作，取出后37℃水浴30min

敏化红细胞

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

混匀，37℃水溶30min

结果

判定

#

#

+++

++

+

一

#

一

一

一

#

:32

全不溶

全不溶

25%

溶

50%

溶

75%

溶

全溶

全溶

全不溶

全溶

全溶

全溶

全不溶

成分

被检血清

各项”对照

试验孔

抗补体

对照

阳性

血清

阴性血清

抗原

对照

溶血素

生理

盐水

效价

114

118

1116

1132

1164

11128

114

2个工作量

114

2个工作量

血清

25

25

25

25

25

25

25

25

25

2工作量抗原

25

25

25

25

25

25

25

25

25

2单位

补体

50

50

50

50

50

50

50

50

50

50

50

生理盐本

25

25

50

100

表2(续)

SN/T2700—2010

SN/T

单位为微升

成分

被检血清

各项对照

试前孔

抗补体

对照

阳性

血清

刚性血清

抗原

对照

溶血素

生理

盐水

效份

1:4

1:8

1:16

1:32

1:64

1:128

1:4

2个工作量

1:4

2个工作量

视匀，4℃16h～18h感作，取出后37℃水浴30min

敏化红细胞

50

50

50

50

50

50

50

50

50

50

50

50

混匀，37℃水溶20min

蜡果

判定

#

#

+++

十十

+

一

一

#

一

一

#

1:32

全不溶

全不溶

25%

溶

50%

溶

75%

溶

全溶

全溶

全不溶

全溶

全溶

全溶

全不溶

7结果判定

7.1在最后一次37℃水浴(或汽浴)30min后，立即进行试验结果判定。

7.2各组对照为如下结果时试验方成立，否则应重复试验：——被检血清抗补体对照：完全溶血(一);

——阳性血清加抗原对照：完全抑制溶血(#);

—阴性血清加抗原对照：完全溶血(一);

——抗原抗补体对照：完全溶血(一);

——溶血素对照；完全溶血(一);

—生理盐水对照；完全抑制溶血(#)

7.3判定标准；血清效价以50%溶血(++)为判定终点。被检血清效价；

—≥1:8(++)判为阳性；

——1:4(+++)判为阴性：

—-1:4(++)判为可疑；重复试验仍为可疑，则判为阳性。

SN/T2700—2010

附录A

(规范性附录)

补体效价滴定

单位为毫升A.1用生理盐水将补体作1:60稀释，按表A.1测定补体效价。

单位为毫升

表A.1补体效价滴定

组别

抗原

生理盐水

试管号

2

3

5

6

7

1

3

4

5

6

7

二单位抗原

0.1

0.1

0.1

0.1

0.1

0.1

0.1

一

一

一

一

一

一

一

生理盐水

0,27

0,25

0,22

0.20

0.18

D.16

0.14

0.37

3

0.32

0.30

0.28

0.26

0.24

1:60补体

0.03

0.05

0.08

0.10

0.12

0.14

0.16

0.03

0.05

0.08

0.10

D.12

0.14

0.16

混匀，37℃水溶30min

敏化红细胞

0,2

0,2

o,2

0,2

0,2

0,2

0,2

0,2

0,2

0,2

0,2

0,2

0,2

0,2

混匀，37气本落30min

结果示例

#

+++

十十

+

#

+++

十十

+

一

全不密

25%

溶

80%

溶

75%

溶

全溶

全溶

全溶

全不溶

25%

溶

50%

溶

78%

溶

全溶

全溶

全溶

注：敏化红组胞系由1%公绵羊红细胞悬液加等量的2个工作单位的溶血素，故37℃水俗15min后再滴加。

A.2补体效价的计算；能使红细胞完全溶