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酶化学

单体酶：由一条肽链组成，一般不需要辅助因子。

寡聚酶：由两个或两个以上亚基组成的酶。大多是调节酶，多含偶数个亚基。

同工酶：指催化化学反应相同，蛋白质分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。

酶的比活力：每毫克酶蛋白中所含有的酶活力单位。回收率：每次提纯后酶制剂的比活力/提取液总活力。纯化倍数：每次提纯后酶制剂比活力/提取液比活力。

组成酶：是细胞从恒定速率和恒定数量生成的酶类，是细胞中天然存在的，其含量较稳定，一般不受外界条件的影响。

诱导酶：是细胞中进入特定的诱导底物后，被诱导生成的，其有无及含量的多少受外界条件的影响。

酸碱催化：由质子转移所致的催化作用为酸碱催化作用；由催化剂向反应物提供质子为酸催化，由催化剂从反应物中夺取质子为碱催化。

共价催化：在酶催化反应过程中，酶与底物以共价键结合成中间物过滤态以加速反应。

即在催化时，亲核催化剂或亲电催化剂能分别放出点子或汲取电子，并作用于底物的缺电子反应中心或负电中心，迅速形成不稳定的共价键中间复合物，降低反应活化能，使反应加速。

酶的亲核标记：根据酶与底物能特异性结合的性质，设计合成一种含反应基因的底物类似物，作为活性部位的标定试剂，它能像底物一样进入酶的活性部位，并以其活泼的化学基团与酶的活性基团的某些特定基因共价结合，使酶失去活性。

Ks型不可逆抑制剂：这类抑制剂主要作用于酶活性部位的必须基团，但也作用于酶非活性部位，取决于抑制剂与酶活性部位必须基团在反应前形成非共价络合物的解离常数以及与非活性部位同类基团形成非共价络合物的解离常数之比，即Ks的比值，故称为Ks型不可逆抑制剂。

Kcat型不可逆抑制剂：这类抑制剂不但具有与天然底物相类似的结构，而且本身也是酶的底物，可被酶催化而发生类似底物的变化。但这类抑制剂还有一种潜伏性的反应基团，这种基团可因酶的催化而暴露或活化，作用于酶活性中心或辅基，使酶共价共价修饰而失活。

酶分子修饰：通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的过程，称为酶分子修饰。

化学修饰酶：在不引起酶蛋白变性的条件下，某些试剂能与氨基酸残基的侧链基团反应，引起共价结合、氧化、还原等修饰反应，使基团的结构和性质发生改变，称为化学试剂修饰。具有这种性质的酶称为化学修饰酶。

变构酶与变构调节：变构酶又称别构酶，指酶分子的非催化部位与某些化合物可逆地非共价结合后，引起酶的构象的改变，进而改变酶的活性状态，酶的这种调节称为变构调节，具有变构调节的酶称为变构酶，凡能使酶分子发生别构作用的物质称为别构剂，通常用小分子代谢物或辅因子。

过滤态底物类似物：过滤态底物类似物可作为竞争抑制剂。是指底物和酶结合成中间复合物后被活化的过渡形式，由于能障小，和酶结合后紧密得多，这是酶具有高度催化效率的原因之一。

简述酶分离提纯的一般过程及注意事项：

因为酶也是蛋白质的一种，其分离提纯过程同蛋白质的分离提纯过程，一般分为：

、前处理：包括破坏组织，将细胞的亚细胞颗粒碎片与溶液分开，并用适当的缓冲液将蛋白质提取出来。

、粗分级分离：采用适当的方法，将需要的蛋白质与其他蛋白质分开。常用方法：盐析法、有机溶剂法、等电沉淀法等。

、细分级分离：进一步用层析法或电泳对所需蛋白质进行纯化。注意事项：

、选材：选择酶含量丰富的新鲜生物材料。一种酶含量丰富的组织或器官往往

与含量较低的组织或器官相差上千倍或上万倍，目前常用微生物为材料制各种酶制剂。

、破碎：动物组织较易破碎，一般通过研磨器、匀浆器、高速组织捣碎机即可

达到目的，微生物及植物细胞壁较厚，需用超声波、细菌磨、冻融、溶菌酶或用某些化学试剂加以破碎，制成组织匀浆。

、抽提：在低温下，以H2O或低盐缓冲液，从组织匀浆中提取酶，得到酶的粗提液。

、分离与纯化：酶是生物活性物质，在分离纯化时必须注意必须尽量降低酶活性损失，操作条件要温和，全部操作一般在0~5℃间进行。

何谓酶活力：指酶催化某化学反应的能力，其大小可以用在一定条件下所催化的某一化学反应的反应速率来表示，两者呈线性关系。

测定酶活力的原理：通过测定酶促反应的初速度来测定酶活力。酶促反应的初速度越大，酶的活力就越强，反之，反应速度越小，酶的活力越若。

酶活性的测定方法：

、测压法：底物或产物之一是气体或酸的，可以用测压计来测定气体体积的变化。

、分光光度法：底物或产物在紫外光、可见光或红外光区域具有光的吸收。

、荧光法：

、电化学法：PH测定法、电位测定、电流测定等

、旋光测定法：若底物和产物的旋光性不同，可通过测定反应混合物的旋光性

、同位素测定法：用放射性同位素标记底物，酶反应后分离产物。

温度影响酶活性的机理：

、温度影响反应体系中的活化分子数，：温度增加，活化分子数增加，反应速度增加。化学反应中温度每增加10度反