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4-4酶促反应动力学1

大家好，我是你们的主讲老师王杨，今天我们一起来学习酶促反应动力学。

那什么是酶促反应动力学呢？我们为什么要研究他呢？酶促反应动力学主要是研究酶促反应的速率规律以及影响此速率的各种因素，以便帮助我们寻找酶促反应的最佳条件。那么影响酶促反应速率的因素有哪些呢？主要有这么几种，酶浓度、底物浓度、pH值、温度、激活剂和抑制剂。我们今天先来看看。。。。。

酶的反应速率是什么呢？若以蔗糖在蔗糖转化酶的作用下分解为葡萄糖和果糖的反应为例，x克的蔗糖在t时间内被转化为了葡萄糖和果糖，那么蔗糖转化酶的反应速率就是x和t的比值。了解了酶促反应的速率之后，我们来看看影响酶促反应速率的因素。

首先是酶浓度的影响，在一个酶作用的最适温度和pH值下，如果底物浓度够大且足以使酶饱和，那么酶促反应的速率v和酶浓度[E]成正比例关系，表示为v=K{E}，其中K是反应速率常数。可以理解为酶是一些工人，而底物是生产原料，当生产原料足够多的时候，投入的工人如果越多，那么生产出的产品也就越多越快，反应速率也就越高。因此，在酶的最适条件下，底物浓度足够大时，反应速率随酶浓度的增高而增大。

接着我们来看看底物浓度对反应速率的影响，1903年科学家们在蔗糖酶水解蔗糖的实验中观察到，在pH和温度最适，且酶浓度不变的条件下，用测出的一系列不同底物浓度下的反应速率对底物浓度作图可以得到这样一幅图，大家注意观察这个曲线有什么特点呢？当底物浓度[S]很小的时候，反应速率随底物浓度呈直线上升，随着底物浓度[S]的增大，反应速率增大的幅度也慢慢减弱，最后当底物浓度[S]很大的时候，反应速率几乎恒定，趋向一个极限。

我们可以把反应体系看做一间教室，教室里的课桌椅是酶，也就是说酶的数量是固定的，而底物是进入教室的学生，当底物浓度[S]很小的时候，也就是说有少量的学生进入空着的教室，这个时候学生可以很快找到座位，也就是底物可以很快和酶结合为中间产物，中间产物越多，反应速率也就越快，因此这个时候的反应速率和底物浓度是成正比的，

而当底物浓度不断增加，就好比进入教室的学生越来越多，学生虽然能够找到座位，但是需要花费一定时间，也就是底物和酶结合成中间产物的速率有所下降，因此反应速率不再随底物浓度成正比例增加，也就是我们说的混合级反应。

而当底物浓度高到一定程度，可以将所有酶都饱和时，就算再增加底物浓度，都无法提高反应速率，就好比教室里的课座椅已经坐满了人，就算再增加学生，学生也找不到课桌椅坐下来了，因此这时达到最大速率，反应速率不再随底物浓度增加而变大，呈零级反应。

酶促反应速率与底物浓度的关系，可以利用中间产物学说来说明，就好比我们刚才打的比方，学生是底物，课桌椅是酶，酶首先和底物形成中间复合物ES，然后再释放出产物P和酶E，因此反应速率取决于中间复合物的浓度。

在1913年，米凯利斯和门顿对酶促反应速率和底物浓度之间的关系进行推导，得到了底物浓度[S]和酶促反应速率v之间的定量关系的方程式，我们称之为米氏方程，其中[S]是底物浓度，v是不同底物浓度时的反应速率，Vmax是最大反应速率，Km则是米氏常数，下面我们来看看这个方程是怎么推导出来的。

对于这样一个反应式，A和D是反应物，G和H是产物，我们可以定义他的反应速率为v=K乘以A的a次方，再乘以D的d次方，其中K就是我们说的反应速率常数，也就是一定条件下反应物浓度均为1mol/L时的反应速率。

对于一个酶促反应，我们可以把它拆分为四步反应，首先是酶E和底物S生成中间复合物ES，反应速率常数是k1；第二个是中间复合物ES分解为酶E和底物S，反应速率常数是k2；第三反应是中间复合物ES释放出酶E和产物P，反应速率常数为k3,；最后一个反应是酶E和产物P又生成中间复合物ES，反应速率常数是k4；但是我们测定的是初速度，也就是说这个时候产物P的生产量极少，由产物P和酶E生成中间复合物ES的这一反应可以忽略。因此我们得到这样一个反应式，只留下我们刚才说的前三步反应。

[E]是指此时体系里的瞬时酶浓度，[S]是指底物浓度，而[ES]是指中间复合物的浓度。其中第一个反应，酶E和底物S生成中间复合物ES的反应速率v1=K1乘以E的浓度，再乘以S的浓度，也就是v1=k1[E][S],同理我们可以得到v2和v3的速度。而在这个反应体系中，当ES的生成速率等于ES的分解速率时，反应达到平衡。也就是说当v1=v2+v3时，反应速率达到平衡，那么我们把上面的三个速率的公式带入v1=v2+v3，得到k1[E][S]=K2[ES]+K3[ES],

合并同类项整理后可以得到[E]乘以[S]再除以[ES]等于k2+k3再除以k1，为了表示方便，用km带代替k2+k3除以k1，km也就是我们说的米氏常数。其中[E]的浓度也就是酶的瞬时浓度很难