微生物实用小册（内部资料）.doc

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目录

HYPERLINK革兰氏染色法……1

HYPERLINK抗酸杆菌染色……3

HYPERLINK墨汁染色查新型隐球菌………………6

HYPERLINK涂片查细菌报告方式………………7

HYPERLINK临床标本接种培养基………………8

HYPERLINK细菌细胞壁染色法………………9

HYPERLINK鞭毛申云氏法（水法）…………10

HYPERLINK标本划线接种法………………12

HYPERLINK靛基质试剂……16

HYPERLINK硝酸盐还原试剂………………18

HYPERLINK志贺氏菌属鉴定程序………………20

HYPERLINK沙门氏菌属鉴定程序………………21

HYPERLINK鉴定β溶血链球菌所用的CAMP实验的划线法………………23

HYPERLINKβ溶血链球菌双歧索引……………27

HYPERLINKD群链球菌属的鉴别………………28

HYPERLINK葡萄糖酸盐阳性菌群的属间鉴别…29

HYPERLINK苯丙氨酸，葡萄糖酸盐阴性各菌属的鉴别………………30

HYPERLINK临床常见肠杆菌属鉴别…………31

HYPERLINK临床常见克雷伯属的鉴别…………32

HYPERLINK多源菌属的鉴别………………33

HYPERLINK枸橼酸杆菌属种的鉴别…………34

HYPERLINK变型杆菌属，普罗菲登斯菌属，摩根氏菌属的属间，种间区别………………35

HYPERLINK变型杆菌属种间区别………………36

HYPERLINK普罗菲登斯菌种间区别……………37

HYPERLINK几种嗜血杆菌的鉴别………………38

HYPERLINKＧ－球菌的鉴别……39

HYPERLINK不动杆菌属几个种的鉴别…………40

HYPERLINK莫拉氏菌属种的鉴定………………41

HYPERLINK黄杆菌属种的鉴定………………42

HYPERLINK假单胞菌首选生化反映…………43

HYPERLINK几种重要的细菌性腹泻…………44

HYPERLINK抑制变型杆菌扩散生长的方法…45

HYPERLINK沙雷氏菌属种的鉴别………………46

HYPERLINK产碱杆菌属的鉴别………………47

HYPERLINKL型细菌的检验……48

HYPERLINK细胞壁染色……49

HYPERLINK斯氏假单胞菌……50

HYPERLINK小肠结肠炎耶尔森氏菌…………51

HYPERLINK气单胞菌鉴定双歧索引…………52

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革兰氏染色法

试剂：①结晶紫②碳酸钠溶液

③碱性碘液④丙酮酸酒精

⑤碱性复红水溶液

方法：

将标本均匀涂布于洁净玻片上，自然干燥，火焰微热固定

滴加结晶紫（革兰甲液）和碳酸钠液（革兰乙液）各2滴，初染30秒钟，水洗。

用碱性碘液2滴固定30秒钟，水洗

用丙酮酸酒精脱色至无兰色脱落为止（约5－10秒），水洗。

用碱性复红水溶液复染5秒钟，水洗待干镜检。

结果：

革兰氏染色阴性细菌在视野下呈淡红色。

革兰氏阳性细菌呈深紫色

第二页

注意事项：

涂片应均匀，厚薄适宜，应自然干燥后再加微热固定。以热而不烫手为易，过热易使细菌变形。

脱色要至无兰色脱落为止。

复染时间不可过长，以免细菌均染成G—菌。

枯草杆菌，链球菌有时染成紫红色，是因为细菌繁殖代谢中有紫色嗜变性，不一定全是染色原因，所以要根据其菌体形态加以确定。

第三页

抗酸杆菌染色

试剂：①石碳酸复红溶液

②盐酸酒精溶液

③碱性美兰溶液

方法：

加满石碳酸复红溶液在已固定德标本玻片上，加温2－3分钟，使染液即有蒸汽上升又不致沸腾，不时添加染液，以免在受热情况下干凅。

倾出染液，以DH2O冲洗后用盐酸酒精溶液脱色，直至玻片无红色为止。

DH2O冲洗，用碱性美兰复染1分钟。

DH2O冲洗，待干镜检。

结果：

抗酸杆菌被染成红色，背景为兰色。

第四页

庞氏染色法

试剂：庞氏染液

方法：

涂片经自然干燥后经火焰固定，滴加庞氏染液2滴，静染3－5分钟后，水洗，待干镜检。

结果：

双级体杆菌菌体呈淡兰色

两端级体呈深紫兰色

报告：

查见双级体杆菌或未查见白喉杆菌

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细菌和霉菌的涂片法

于洁净载玻片上滴加一小滴生理盐水，再用接种环挑取少许标本均匀涂布于盐水中或取液体标本经离心后直接涂片。

待玻片自然干燥后，将玻片迅速经火焰数次固定，玻片以手感热而不烫为宜，杀死细菌，保持细菌原有形体结构，并使细菌易于着色。

注意