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DNA通过复制传递遗传信息
DNA复制推测DNAreplicationhypothesis沃森和克里克核酸的分子结构值得注意的是,我们提出的这种碱基特异性配对方式,暗示着遗传物质进行复制的一种可能机制。
DNA复制推测DNAreplicationhypothesis①DNA复制时,DNA双螺旋解开,互补的碱基之间的氢键断裂;②解开的两条单链分别作为复制的模板,游离的脱氧核苷酸依据碱基互补配对原则,通过形成氢键,结合到作为模板的单链上;③新合成的每个DNA分子中,都保留了原来DNA分子中的一条链,这种复制方式被称做半保留复制。(教材P53P52)DNA结构对遗传的影响
DNA复制推测DNAreplicationhypothesisDNA可能的复制方式半保留复制全保留复制弥散复制+++
全保留复制半保留复制弥散复制子一代子二代亲代1、实验假设一、探究DNA的复制过程实验方法:同位素标记法和密度梯度超速离心法
实验目的:探究DNA复制方式自变量:DNA复制的代数应变量:DNA单链组合控制分裂时间同位素标记法放射性同位素标记?14N/15N标记C、H、O、N、P密度梯度离心
DNA半保留复制的实验证据ExperimentalEvidenceforSemi-RetentionDuplicationofDNA问题5:要验证上述预测,就要分别观察亲代和子代的情况,但实验中,复制后的DNA分子混合在一起的,不易分离。怎么解决这个问题?密度梯度离心
离心、差速离心与密度梯度离心DNA半保留复制的实验证据ExperimentalEvidenceforSemi-RetentionDuplicationofDNA差速离心:起始的离心速度较低,让较大的颗粒沉降到管底,小的颗粒仍然悬浮在上清液中。收集沉淀,改用较高的离心速度离心悬浮液,将较小的颗粒沉降。差速离心:用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度(不均匀的介质),将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。
转移到含14NH4Cl的培养液大肠杆菌在含15NH4Cl的培养液中培养若干代第一代第二代第三代提取DNA进行密度梯度超速离心繁殖一代繁殖一代15N/15N-DNA15N/14N-DNA14N/14N-DNA中带(中间型)轻带(轻氮型)重带(重氮型)15N/14N-DNA中带(中间型)
DNA半保留复制的实验证据ExperimentalEvidenceforSemi-RetentionDuplicationofDNA15N/15N-DNA重链15N/15N-DNA重链14N/14N-DNA轻链15N/15N-DNA重链15N14N亲代DNA子一代DNA子二代DNA15N15N14N15N14N15N14N14N14N14N14N15N若DNA的复制方式为全保留复制14N/14N-DNA轻链预计离心结果单链组合重带重带轻带重带轻带
DNA半保留复制的实验证据ExperimentalEvidenceforSemi-RetentionDuplicationofDNA15N/14N-DNA中链15N/15N-DNA重链14N/14N-DNA轻链15N/14N-DNA中链15N14N亲代DNA子一代DNA子二代DNA15N15N14N15N14N15N14N14N14N14N14N15N若DNA的复制方式为半保留复制预计离心结果单链组合重带中间带轻带中间带
DNA半保留复制的实验证据ExperimentalEvidenceforSemi-RetentionDuplicationofDNA15N/15N-DNA重链15N亲代DNA子一代DNA子二代DNA15N若DNA的复制方式为弥散复制15N/15N-DNA+14N/14N-DNA2115N/15N-DNA+314N/14N-DNA4中链中-轻链之间预计离心结果单链组合重带中间带中-轻链之间
半保留复制全保留复制弥散复制第一代第二代第三代实验结论:DNA的复制方式为半保留复制标注15N和14N
解旋解旋酶在解旋酶的作用下,两条链的配对碱基之间的氢键断开,碱基暴露出来,形成了两条“模板链”,即母链。合成子链DNA聚合酶以两条母链为模板,4种脱氧核苷酸为原料,按碱基互补配对原则合成为两条新的子链。子链(新合成的链)3’3’5’3’5’5’3’5’模板链二、DNA复制的过程重新螺旋边解旋边复制氢键断开需要酶,重新形成不需要酶
DNA复制的过程TheprocessofDNAreplica
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