第六章液相色谱分析法第五节分离方法的选择86课件.ppt

第六章

液相色谱分析法一、影响分离的因素factorsinfluencedseparation二、分离类型的选择choiceofseparationtypes三、液相色谱的应用applicationofHPLC四、液相制备色谱preparativeliquidchromatography一、影响分离的因素

factorsinfluencedseparation2.流速二、分离方法选择三、HPLC的应用

applicationofHPLC2.稠环芳烃的分析四、制备型液相色谱

preparativeliquidchromatography制备型液相色谱仪：请选择内容**第五节

分离方法的选择highperformanceliquidchromatographchoiceofoperationcondition1.影响分离的因素与提高柱效的途径在高效液相色谱中,液体的扩散系数仅为气体的万分之一，则速率方程中的分子扩散项B/u较小，可以忽略不计，即：H=A+C·u故液相色谱H-u曲线与气相色谱的形状不同，如图所示:(1)固定相：液体的黏度比气体大一百倍，故降低传质阻力是提高柱效主要途径;由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效;(2)流动相：液相色谱中，不可能通过增加柱温来改善传质。(恒温);改变淋洗液组成、极性（或梯度淋洗）是改善分离的最直接的因素。流速大于0.5cm/s时，H-u曲线是一段斜率不大的直线。降低流速，柱效提高不是很大。但在实际操作中，流量仍是一个调整分离度和出峰时间的重要可选择参数。气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱，其选用原则与气相色谱一样。但在高效液相色谱中，分离柱的制备是一项技术要求非常高的工作，一般很少自行制备。3.固定相及分离柱1.环境中有机氯农药残留量分析固定相：薄壳型硅胶(37～50?m)流动相：正己烷流速：1.5mL/min色谱柱：50cm?2.5mm(内径)检测器：差示折光检测器可对水果、蔬菜中的农药残留量进行分析。稠环芳烃多为致癌物质。固定相：十八烷基硅烷化键合相流动相：20%甲醇-水～100%甲醇线性梯度淋洗，2%/min流速：1mL/min柱温：50oC柱压：70?104Pa检测器：紫外检测器制备色谱的目的，是从混合物中得到纯物质。制备型液相色谱是获得高纯物质(色谱纯)的有效方法。制备柱（内径8mm，长度15～30cm），一次制备量～0.1mg。制备型液相色谱：结构与分析型一样，但泵流量大、进样量大、采用制备柱；柱后馏分收集器。第一节高效液相色谱的特点与仪器featureandinstrumentofHPLC第二节基本原理与主要分离类型basicprincipleandmainseparatingtypes第三节固定相与流动相stationaryphaseandmobilephase第四节影响分离的因素与操作条件选择factorsinfluencedseparationandchoiceofoperationcondition第五节离子色谱法ionchromatograph第六节超临界流体色谱supercriticalfluidchromatograph结束**