酶与其他生物催化剂课件.pptVIP

七、酶活性可被許多抑制劑可逆地或不可逆地抑制（一）可逆性抑制劑與酶非共價結合酶的抑制劑(inhibitor)凡能使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白變性的物質稱為酶的抑制劑。區別於酶的變性抑制劑對酶有一定選擇性引起變性的因素對酶沒有選擇性可逆性抑制（reversibleinhibition）酶與抑制劑非共價結合，可以通過透析、超濾或稀釋等物理方法將抑制劑除去，恢復酶的催化活性。不可逆性抑制（irreversibleinhibition）與酶共價結合，不能通過透析、超濾或稀釋等方法將其除去。可逆性抑制劑抑制劑與酶的調節部位結合，使酶發生變構，從而對酶發揮抑制作用（別構抑制作用）。抑制劑通過與游離酶或/和酶-底物複合物可逆地結合而影響酶的催化活性。k1k2k3+kiEII+S+ESESE+PESI+Iki可逆性抑制作用的抑制劑可以與游離酶結合，形成二元複合物EI；也可以與ES結合，形成三元複合物ESI。1．競爭性抑制劑與底物競爭酶的活性中心定義：抑制劑與底物的結構相似或部分相似，能與底物競爭酶的活性中心，從而阻礙酶-底物複合物的形成，使酶的活性降低。這種抑制作用稱為竞争性抑制作用。+++EESIESEIEP有競爭性抑制劑存在的米氏方程式V=Vmax[S]Km+[S](1+[I]ki)雙倒數方程式是VmaxKm[S]V1=1Vmax1+(1+[I]ki)反應模式+E+SESE+PIEIkik1k2k3SI競爭性抑制作用V對[S]的雙倒數作圖*特點抑制程度取決於抑制劑與酶的相對親和力及底物濃度；I與S結構類似，或部分相似，競爭酶的活性中心；動力學特點：Vmax不變，表觀Km增大。[I]1V1[S]0Km1Km1(1+)[I]kiVmax1--*舉例丙二酸與琥珀酸競爭琥珀酸脫氫酶琥珀酸琥珀酸脫氫酶FADFADH2延胡索酸磺胺類藥物的抑菌機制與對氨基苯甲酸競爭二氫葉酸合成酶二氫蝶呤＋對氨基苯甲酸＋谷氨酸二氫葉酸合成酶二氫葉酸2．非競爭性抑制劑不影響酶對底物的親和力+S－S+S－S+ESIEIEESEPk1k2k3+kiEII+ESESE+P+Iki+SESI*反應模式非競爭性抑制的米氏方程式的雙倒數形式VmaxKm[S]V1=1Vmax1+(1+[I]ki)(1+[I]ki)*特點抑制劑與酶活性中心外的必需基團結合，底物與抑制劑之間無競爭關係；抑制程度取決於抑制劑的濃度；動力學特點：Vmax降低，表觀Km不變。[I]1V1[S]Km1(1+)[I]kiVmax1Vmax0非競爭性抑制作用V對[S]的雙倒數作圖3．反競爭性抑制劑只與酶-底物複合物結合++ESESESIEPk1k2k3+ESESE+P+IkiESI*反應模式反競爭性抑制作用的米氏方程式的雙倒數形式VmaxKm[S]V1=1Vmax1+(1+[I]ki)[I]1V1[S]Km1(1+)[I]kiVmax1Vmax0(1+)[I]kiKm反競爭性抑制作用V對[S]的雙倒數作圖*特點：抑制劑只與酶-底物複合物結合；抑制程度取決於抑制劑的濃度及底物的濃度；動力學特點：Vmax降低，表觀Km降低。各種可逆性抑制作用的比較動力學參數表觀KmKm增大不變減小最大速度Vmax不變降低降低林-貝氏作圖斜率Km/Vmax增大增大不變縱軸截距1/Vmax不變增大增大橫軸截距-1/Km增大不變減