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富血小板血浆操作规范

富血小板血浆（Platelet-RichPlasma,PRP）是通过离心技术从自体全血中分离获得的血小板浓缩物，其血小板浓度通常为全血的3-5倍，并含有多种生长因子（如血小板衍生生长因子PDGF、转化生长因子TGF-β、血管内皮生长因子VEGF等），在组织修复、再生医学领域具有广泛应用。为确保PRP制备的安全性、有效性及一致性，需严格遵循标准化操作流程，涵盖操作前准备、样本采集、离心制备、质量控制、临床应用及注意事项等关键环节。

一、操作前准备

（一）人员资质与培训

参与PRP制备的医护人员需具备临床执业资格，并接受过系统培训，内容包括PRP生物学原理、离心设备操作规范、无菌技术、质量控制标准及并发症处理等。培训后需通过理论考核与操作实践考核，确保熟练掌握各环节要点。

（二）环境要求

操作环境应选择符合《医院消毒卫生标准（GB15982-2012）》的Ⅱ类环境（如洁净治疗室或实验室），空气菌落数≤4CFU（5分钟·直径9cm平皿）。操作区域需划分清洁区（耗材存放）、半污染区（样本处理）及污染区（医疗废物暂存），各区域标识清晰，避免交叉污染。操作前30分钟开启空气消毒设备（如紫外线灯或动态空气消毒机），操作过程中保持环境密闭，减少人员流动。

（三）设备与耗材管理

1.离心机：需选择具备精确转速（误差≤±100rpm）、时间控制（误差≤±1分钟）及温度调节（20-25℃）功能的医用离心机，建议使用水平转子（避免血小板机械损伤）。设备需定期校准（每6个月1次），并记录校准结果；使用前检查转子平衡性，避免离心过程中震动导致分层异常。

2.采血管与离心管：应选择无菌、无热原的一次性塑料材质管（避免玻璃管激活血小板），采血管需预充抗凝剂（常用枸橼酸葡萄糖溶液ACD-A，抗凝剂与全血比例为1:9）。离心管容量需与采血量匹配（如采集60ml全血时选择50ml离心管×2），使用前检查包装完整性及有效期。

3.辅助工具：包括无菌注射器（10ml、20ml）、移液管（5ml、10ml）、止血带、消毒棉签（含75%乙醇）、无菌纱布、医疗废物收集袋等，所有耗材需经严格灭菌处理（如环氧乙烷灭菌），并在有效期内使用。

（四）试剂管理

抗凝剂（ACD-A）需符合《中国药典》标准，存储于2-8℃冰箱，使用前复温至室温（避免低温导致血小板形态改变）。若需体外激活PRP（如制备PRP凝胶），需使用无菌注射用氯化钙（10%浓度）或人源性凝血酶（避免动物源性试剂引发过敏），试剂需单独存放，标识清晰，禁止与其他药物混用。

二、样本采集

（一）患者评估与知情同意

操作前需详细询问患者病史，排除以下禁忌症：①凝血功能障碍（如血友病、血小板减少症，血小板计数＜100×10?/L）；②严重感染（局部或全身）；③恶性肿瘤（活动期）；④近期使用抗凝药物（如阿司匹林、华法林，需停药至少1周）；⑤妊娠或哺乳期（无明确禁忌但需谨慎）。签署知情同意书，告知PRP制备的目的、流程、潜在风险（如感染、血肿）及预期效果。

（二）患者准备

采集前24小时避免饮酒、剧烈运动及高脂饮食（防止血脂过高影响离心分层）；空腹4-6小时（避免乳糜血）；保持情绪稳定（避免应激导致血小板激活）。测量生命体征（血压、心率），确认无异常（如血压＞160/100mmHg需暂缓操作）。

（三）静脉穿刺与血液采集

1.穿刺部位选择：优先选择肘正中静脉或贵要静脉（血管粗直、易于固定），避免选择手背静脉（血管细、易穿破）。

2.消毒与穿刺：以穿刺点为中心，用75%乙醇螺旋式消毒2遍，范围≥8cm×8cm，待干30秒。使用止血带（压力以阻断静脉回流但不阻断动脉血流为宜），暴露静脉后穿刺，见回血后松止血带（避免长时间压迫激活血小板）。

3.血液采集：使用预充ACD-A抗凝剂的采血管，采集量根据制备需求确定（一般单次治疗需PRP5-10ml，故采集全血量为30-60ml）。采血过程需匀速，避免负压过大导致红细胞破裂（溶血会释放血小板活化因子，影响PRP质量）。采血后立即轻柔颠倒采血管8-10次（避免剧烈震荡），使抗凝剂与血液充分混合，防止凝血。

三、离心制备

（一）离心方案选择

PRP制备通常采用双离心法（两次不同转速离心），具体参数需根据设备型号、采血量及目标血小板浓度调整，以下为通用参考方案：

第一次离心（分离血浆与细胞成分）：

-转速：1500-2000rpm（相对离心力RCF=200-400g）

-时间：10-15分钟

-温度：20-25℃（低温会导致血小板形态改变，高温可能加速血小板代谢）

-操作：将采血管对称放入离心机转子，平衡重量差≤0.