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2025年荧光光谱法试题和答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.下列关于荧光产生过程的描述中，错误的是（）

A.分子吸收光子后从基态S?跃迁至激发态S?

B.激发态分子通过振动弛豫迅速回到S?的最低振动能级

C.荧光发射发生于S?→S?的辐射跃迁

D.磷光发射的能量通常高于荧光

答案：D

解析：磷光发射源于三重态T?→S?的跃迁，其能量低于荧光（荧光为S?→S?），因此D错误。

2.某荧光物质的量子产率φ=0.6，其吸收光子数为N?，发射光子数为N?，则N?/N?=（）

A.0.4B.0.6C.1.6D.0.36

答案：B

解析：量子产率定义为发射光子数与吸收光子数的比值，即φ=N?/N?，故答案为0.6。

3.激发光谱与发射光谱的关系中，正确的是（）

A.激发光谱的形状与发射波长无关

B.发射光谱的形状与激发波长无关（在能激发的范围内）

C.激发光谱的峰值波长一定大于发射光谱

D.斯托克斯位移是激发光谱与发射光谱的重叠部分

答案：B

解析：发射光谱反映分子从S?最低振动能级跃迁回S?各振动能级的概率，与激发波长无关（只要能激发至S?），故B正确；激发光谱的形状与监测的发射波长有关（A错误）；激发峰波长通常小于发射峰（C错误）；斯托克斯位移是激发峰与发射峰的波长差（D错误）。

4.下列物质中，荧光量子产率最高的是（）

A.苯（非极性溶剂）B.苯酚（极性溶剂）

C.硝基苯（含强吸电子基团）D.蒽（共轭体系大）

答案：D

解析：共轭体系越大、刚性越强，荧光量子产率越高。蒽的共轭体系远大于苯和苯酚，硝基苯含吸电子基团会淬灭荧光，故D正确。

5.荧光淬灭中，属于动态淬灭的是（）

A.形成非荧光络合物B.能量转移淬灭

C.碰撞淬灭D.自吸收淬灭

答案：C

解析：动态淬灭（碰撞淬灭）是激发态分子与淬灭剂通过扩散碰撞失活；其他选项为静态淬灭（形成复合物）或其他机制，故C正确。

6.荧光分光光度计中，激发单色器通常位于（）

A.光源与样品池之间B.样品池与检测器之间

C.检测器与信号处理器之间D.光源与检测器之间

答案：A

解析：激发单色器用于选择激发光波长，需位于光源与样品池之间，故A正确。

7.某溶液在25℃时荧光强度为I?，50℃时为I?，通常I?与I?的关系是（）

A.I?I?B.I?I?C.I?=I?D.无法确定

答案：A

解析：温度升高会增加分子碰撞，导致非辐射跃迁概率增大，荧光强度降低，故I?I?。

8.时间分辨荧光光谱技术主要用于解决（）

A.背景散射光干扰B.激发光强度不足

C.样品浓度过高D.荧光物质发射峰重叠

答案：A

解析：时间分辨技术通过延迟检测，避开短寿命的散射光（纳秒级），检测长寿命的荧光（微秒至毫秒级），从而消除背景干扰，故A正确。

9.下列关于荧光探针的描述中，错误的是（）

A.对目标物具有高选择性B.响应信号与目标物浓度呈线性关系

C.必须自身具有强荧光D.可用于生物体内动态成像

答案：C

解析：部分探针为“猝灭型”（初始无荧光，与目标物反应后发射荧光），因此“必须自身具有强荧光”错误，故C正确。

10.用标准曲线法测定样品荧光强度时，若标准溶液浓度过高导致自吸收，会使标准曲线（）

A.上弯B.下弯C.保持线性D.无规律变化

答案：B

解析：浓度过高时，激发光在溶液前半部分被强烈吸收，后半部分分子无法被激发，导致荧光强度增长速率低于浓度增长，标准曲线向下弯曲（负偏离），故B正确。

二、填空题（每空1分，共20分）

1.荧光发射的三个基本条件是：分子具有______结构、存在______跃迁、非辐射跃迁概率______。

答案：共轭；π→π（或允许的电子）；小

2.荧光寿命τ的定义是：激发态分子数目衰减至初始值的______所需的时间，其与量子产率φ和激发态寿命τ?的关系为______。

答案：1/e；φ=τ/τ?

3.荧光分光光度计的核心部件包括______、______、______、样品池和检测器，其中检测器通常采用______以提高灵敏度。

答案：光源（氙灯）；激发单色器；发射单色器；光电倍增管

4.斯托克斯位移是指______与______的波长差，其产生原因包括______和______。

答案：激发光谱峰值；发射光谱峰值；振动弛豫；溶剂化效应

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