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1+X可食食品快速检验资源库材料汇报芜湖职业技术大学汇报人：夏楠

水产品中孔雀石绿的快速测定

目录TaskdescriptionPART01任务描述PART02任务目标TaskobjectivePART03知识准备KnowledgepreparationPART04任务实施Taskimplementation

任务描述任务目标知识准备任务实施食品安全快速检测实验室采样员从生产线上采集一批水产样品，包括淡水鱼、淡水虾、海水鱼、海水虾、新鲜贝类等。作为检验员，你需要对这批样品进行孔雀石绿含量的快速测定，来初步判断样品是否违规添加了孔雀石绿，包括：检测原理；检测操作；结果的读取及报告。

任务描述任务目标知识准备任务实施01知识目标①掌握水产品中孔雀石绿的测定方法。②理解水产品中孔雀石绿的测定原理。02技能目标①会依据试剂盒说明进行样品中孔雀石绿的测定。②会对最后的检测结果进行正确判定与报告。③了解水产品中孔雀石绿的测定意义。

任务描述任务目标知识准备任务实施一、孔雀石绿概述孔雀石绿是一种带有金属光泽的绿色结晶体，是一种有毒的三苯甲烷类有机物，它既是杀真菌剂又是染料，易溶于水，溶液呈蓝绿色。图1孔雀石绿结构图

任务描述任务目标知识准备任务实施二、孔雀石绿的检测意义孔雀石绿在鱼体内代谢为隐性孔雀石绿，残留时间长，具有高毒性、高残留和致癌、致畸及致突变等危害。我国于2002年5月将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及其它化合物清单》中。检测孔雀石绿对于保护水产品食用安全起到重要作用。

任务描述任务目标知识准备任务实施孔雀石绿的检测意义在日常监管中，孔雀石绿测定的常用方法主要有高效液相法、液质联用法、酶联免疫方法和胶体金试纸法等。其中，胶体金试纸法是应用竞争抑制免疫层析技术研发的抗生素残留检测方法，与仪器分析技术相比具有操作简便、快捷迅速、灵敏度高等优点，能最大限度地降低工作强度和减小操作误差，适用于样品中孔雀石绿的快速定性检测。二、孔雀石绿的检测意义

任务描述任务目标知识准备任务实施一、检测原理样品中的孔雀石绿与胶体金标记孔雀石绿抗体相结合，进而封闭胶体金标记孔雀石绿抗体上孔雀石绿的抗原结合位点，从而阻止胶体金标记孔雀石绿抗体与纤维素膜上检测区中的孔雀石绿-BSA偶联物结合，使之显色较弱，甚至不显色；反之，如样品溶液中没有孔雀石绿，则不能阻止胶体金标记孔雀石绿抗体与纤维素膜上检测区中的孔雀石绿-BSA偶联物结合，从而显色较强。

任务描述任务目标知识准备任务实施二、操作步骤取一定量的水产样本（鱼、虾等）去除脂肪后，用剪刀剪碎或者用绞肉机搅碎；第一步：称取2g已处理待测样本于15mL离心管中，样本应回温至室温；第二步：加入1管试剂A，3mL试剂B，振荡混匀1min，4000rpm离心5min；第三步：取上清1mL至5mL离心管，加入50uL试剂C,200μL试剂D，振荡混匀30s后4000rpm离心1min；第四步：

任务描述任务目标知识准备任务实施二、操作步骤移取100μL下层溶液于1.5mL离心管，加入250μL试剂E，上下混匀30s后取120μL于酶标孔中，反复吹打至孔内红色物质完全溶解，等待反应2min；第五步：将检测卡平放，吸取孔内所有溶液滴加到加样孔中，加样后开始计时；第六步：反应5min根据示意图判断结果，其它时间判读无效。第七步：

任务描述任务目标知识准备任务实施1.阴性(未检出):T线颜色≥C线颜色。2.阳性(检出):T线颜色C线颜色；T线不显色。3.无效：C线不显色。三、结果判读

任务描述任务目标知识准备任务实施四、注意事项1.操作时请勿触摸试纸显示区，检测时避免阳光直射及风扇直吹。2.本实验仅用于初筛，最终结果以仪器方法确证为准。3.本实验用完以后产生的固体及液体废弃物，应根据当地法规要求进行处理，避免污染。

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