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2025年医学科研实验工作总结

2025年，本实验室医学科研实验工作紧密围绕“精准医学驱动下的疾病机制解析与转化应用”核心目标，聚焦肿瘤免疫微环境调控、神经退行性疾病新型靶点验证、基于多组学的疾病早期诊断技术开发三大方向，系统开展基础研究与应用转化实验。全年共完成关键实验项目23项，其中12项进入临床前验证阶段，5项启动Ⅰ期临床试验，获授权发明专利7项，在《NatureMedicine》《CellMetabolism》等期刊发表SCI论文14篇（IF10论文8篇）。现将本年度实验工作核心进展总结如下：

一、肿瘤免疫微环境调控机制与治疗策略优化实验

本年度肿瘤方向实验以“增强CAR-T细胞实体瘤穿透性与持久性”为突破口，针对传统CAR-T在实体瘤中存在的浸润不足、耗竭加速、脱靶毒性等瓶颈问题，开展多维度技术改进。

1.双靶点CAR结构设计与功能验证

基于前期对结直肠癌肿瘤微环境（TME）的单细胞测序数据（样本量n=52），发现92%的肿瘤组织同时高表达CEA与GPC3，且两者在正常组织中共表达率仅3%。据此设计CEA/GPC3双靶点CAR结构，其中胞内区采用4-1BB共刺激结构域替代传统CD28，以延长T细胞存活时间。体外实验显示，双靶点CAR-T对CEA+/GPC3+肿瘤细胞的杀伤效率（LD50=2.3:1）较单靶点CAR-T（CEA单靶点LD50=5.1:1，GPC3单靶点LD50=4.8:1）提升50%以上，且对CEA+/GPC3-或CEA-/GPC3+细胞的脱靶杀伤率控制在2%以下（单靶点组脱靶率分别为15%、12%）。

体内实验中，荷人源结直肠癌PDX模型小鼠（n=20）经双靶点CAR-T治疗后，肿瘤体积抑制率达78%（单靶点组分别为52%、49%），且治疗后30天外周血中CAR-T细胞存活比例（12.7%）显著高于单靶点组（CEA组6.3%，GPC3组5.8%），提示4-1BB共刺激结构域有效延缓了T细胞耗竭。

2.代谢重编程改善CAR-T功能实验

针对TME中低氧、高乳酸的代谢抑制环境，实验团队通过敲低CAR-T细胞内乳酸转运体MCT1（采用慢病毒转染siRNA，敲低效率80%），同时过表达线粒体解偶联蛋白UCP2（转染效率75%），构建“低乳酸摄入-高线粒体灵活性”的代谢改良型CAR-T。体外共培养实验显示，在乳酸浓度10mM的环境中，改良型CAR-T的ATP生成量（2.1nmol/10^6细胞）较未改良组（0.8nmol/10^6细胞）提升162%，IFN-γ分泌量（320pg/mL）提升2.3倍，且CD39+PD-1+耗竭表型细胞比例（8.5%）显著低于未改良组（27.3%）。

该改良策略已与XX生物制药公司合作开展工艺优化，目前完成3批次大规模扩增（每批细胞数1×10^9），活率均95%，内毒素、支原体检测均符合《细胞治疗产品生产质量管理规范》要求，计划2026年Q1启动Ⅰ期临床试验（NCT编号待注册）。

二、神经退行性疾病新型靶点验证与干预实验

本年度神经方向实验聚焦阿尔茨海默病（AD）与帕金森病（PD）的发病机制交叉研究，重点验证小胶质细胞异常激活在两种疾病中的共性作用，并探索靶向调控策略。

1.AD/PD共病模型构建与小胶质细胞表型分析

通过APP/PS1双转基因AD模型小鼠（n=30）与α-synuclein过表达PD模型小鼠（n=30）杂交，成功构建AD/PD共病模型（n=25），其行为学表现为Morris水迷宫潜伏期延长（较野生型延长40%）与转棒试验跌落时间缩短（较野生型缩短35%），脑内同时检测到Aβ斑块（ThioflavinS染色阳性面积占比8.2%）与路易小体（α-synuclein免疫组化阳性细胞占比15.3%）。

单细胞RNA测序（10×Genomics平台，检测细胞数25,000）显示，共病模型中小胶质细胞聚类为3个亚群：经典激活型（CD86+，占比32%）、促修复型（CD206+，占比18%）、新型病理相关型（PAM，特征基因包括Apoe、Cst7，占比50%）。与单纯AD或PD模型相比，共病模型PAM亚群比例显著升高（AD模型41%，PD模型38%），且高表达补体通路基因（C1qa、C3）与溶酶体功能抑制基因（Ctsb、Ctsd），提示PAM可能通过“过度补体介导的突触清除-溶酶体功能障碍”双重机制加速神经退行。

2.靶向小胶质细胞PAM亚群的干预实验

基于PAM亚群特异性高表达GPR34受体（共病模型中mRNA表达量较野生型高4.7倍），实验团队设计GPR34拮抗剂（化合物X，分子量452.3，血脑屏障渗透率32%），通过腹腔注射（剂量10mg/kg，每日1次，连续28天）干预共病模型小鼠（n=15）