急性运动对骨骼肌线粒体氧化应激及氧化应激信号转导通路相关基因影响的研究.pdfVIP

摘要 研究目的：肌肉收缩过程中，从线粒体电子传递呼吸链或其他氧化 酶过程中产生 ROS ，ROS 在肌肉适应运动导致的氧化应激过程中起着 重要的作用，氧化应激可以作为信号分子激活氧化还原敏感型信号转导 途径，从而影响细胞的生物学功能。ROS 刺激的细胞信号转导途径较多， 如影响细胞增殖分化的 ASK1 、NFkB 和 Shc 途径，影响抗氧化酶活性 的 Ref1 途径，还有影响离子稳态的一些信号通路。同时，这些信号之 间也有一些协调效应。但目前关于急性运动性氧化应激对 ROS 信号转 导途径相关基因的调控的报道很少。本研究为了证实这一点，建立急性 跑台运动小鼠模型，试图探讨急性运动性氧化应激如何调控信号转导通 路的相关基因的表达。 研究方法：100 只清洁级成年雄性ICR小鼠，随机分为三组：分别 是对照组，急性运动组和恢复组。急性运动组根据运动时间又分为四组， 分别是运动45min组（E ），运动90min组（E ），运动 120min组（E ） 1 2 3 和运动150min组（E ）；恢复组根据恢复时间分为3h恢复组（R ），6h 4 1 恢复组（R ），12h恢复组（R ），18h恢复组（R ）和24h恢复组（R ）， 2 3 4 5 其中运动组小鼠根据制定的时间运动，恢复组小鼠均运动到150min ，然 后根据制定的时间进行恢复，然后将每组鼠的腓肠肌和股四头肌均迅速 取出，腓肠肌进行线粒体的制备，股四头肌进行分子指标的测试，生化 指标分别测试SOD、MDA 、CuZnSOD 、H2O2 、CAT 、NO 、NOS ，这 些指标的测试均采用试剂盒。Real-time PCR测试指标分别是：Ref1 、 Nrf2 、SOD1、SOD2、ASK1 、NFkB 、P53 、P66 、FKHRL1 ；Western Blotting 测试指标是：Ref1 、ASK1 、NFkB 、P53 、P66 、FKHRL1 。 3    研究结果：（1）与对照组相比，小鼠体重在急性递增负荷运动中未 见显著性差异（P0.05），在急性递增负荷运动之后的 24 恢复过程中也 未见显著性差异（P0.05），同时，急性递增负荷运动后 24 小时恢复过 程中对小鼠体重也无显著性影响（P0.05）；与对照组相比，小鼠左侧腓 肠肌湿重和左侧股四头肌湿重在急性递增负荷运动中未见显著性差异 （ P0.05），在急性递增负荷运动之后的 24 恢复过程中也未见显著性差 异（P0.05），同时，急性递增负荷运动后 24 小时恢复过程中对小鼠骨 骼肌湿重也无显著性影响。（2）与对照组相比，小鼠骨骼肌H O 浓度在 2 2 急性递增负荷运动过程中，运动至45min 时出现显著性增加（P0.05）， 运动至 90min 时出现极显著性增加（P0.001），这种状态一直持续到运 动后恢复期的 6h （ P0.001）；在急性恢复阶段，骨骼肌H O 浓度显著性 2 2 下降，下降到恢复期 12h 时（P0.05），达到最低点，然后在恢复期 18h 时从数值上看逐渐增加，至恢复期 24 小时时，与对照组相比，具有统 计学差异（P0.05）；与对照组相比，小鼠骨骼肌CAT 的活力在急性递增 负荷运动过程中，运动至 45min 时出现下降趋势，但还没有出现显著性 下降（P0.05），当运动至90min 时出现显著性下降，然后随着运动时间 的延长，逐渐增加，