桂林蛇源裂头蚴分离株的分子鉴定及种系发育关系分析.pdfVIP

动物医学进展 ，201l，32(1O)：28—32 ProgressinVeterinaryM edicine 桂林蛇源裂头蚴分离株的分子鉴定及种系发育关系分析 李雯雯 ，李 健 ，李树清孙，张鸿满。，黄维义 (1．广西大学动物科学技术学院，广西南宁 530005；2．上海出入境检验检疫局， 上海 200135；3．广西疾病预防控制 中心，广西南宁 530021) 摘 要：为研究从桂林草花蛇 中分离到的裂头蚴的分子分类地位 ，对其核糖体 18SrDNA、28SrDNA、 ITS全基 因及 线粒体 coxl部分基 因进行 了克隆和序 列分析。从 GenBank获取相应基 因序 列，应用 CLUSTALW2软件进行多重比对分析序列差异 ，应用 MEGA4．0软件构建种系发育树 。结果表 明，在基 于 18S、28S基 因序列构建的种系发育树 中，本株裂头蚴分别与欧猥迭 宫绦虫(D64072)18S构成一个单独 分支，自展值 为 100 ；与拟曼迭宫绦 虫(AF004718)、欧猥迭宫绦 虫(AF004717)、无头蚴绦 虫 (AF096223) 28S同属一个分支，自展值 61 。基于ITS1、ITS2和 coxl部分基 因序列构建的种系发育树与所有欧猥迭 宫绦虫均构成 同一亚群 ，总分支 自展值分别为 100 、99 、64 ，三者在不同的分 离株之 间呈现基 因多态 性 ，从总分支 自展值来看 coxl比ITS更适合用于种内遗传 多态性研 究，ITS适合做 定种的分子标记 。 关键词 ：裂头蚴 ；小亚基；大亚基 ；内转录间隔区；细胞色素 C氧化酶第 1亚基 中图分类号：$852．71 文献标识码 ：A 文章编号：1007—5038(2011)10—0028—05 裂头蚴 (Plerocercoid)是假 叶 目(Pseudophyl- 于美 国[3]。迭官属裂头蚴寄生的宿主有蛇、蛙，成虫 lidea)裂头科 (Diphyllobothriidea)绦虫蚴 的总称。 寄生于猫 、狗等哺乳动物 ，人类也有感染迭宫绦虫成 人类因食人含有活裂头蚴的鱼类或两栖类动物而引 虫的病例报道 。由迭宫属裂头蚴感染导致人裂头蚴 起的感染性疾病称为人裂头蚴病 (Humanplerocer- 病的病例 ，全球 已报道有 1400伊J，其 中以我国为最 coidosis)。其 中，裂头科绦虫 中以裂头属 (Diphyl— 多[3]。由于南方饮食 习惯 中较为普遍的食用蛇 、蛙 lobothrium)及迭宫属(Spirometra)两类绦虫为主要 等动物，这是人感染该病原的主要途径。鉴于人迭 的致病种 。迭宫绦虫属至今共记载 了超过 1O个 宫属裂头蚴病 已成为重要的食源性寄生虫病 ，了解 种 [1]，被公认为有效种的有欧猬迭宫绦虫 (S．erina— 及掌握裂头蚴的种类与分布情况 ，对该病 的有效控 ceieuropaei或 S．erinacei)以及拟曼迭宫绦虫 (S． 制和预防有着重要的公共卫生意义 。 mansonoides)[2]，前者呈世界性分布 ，后者主要分布 收稿 日期 ：2011-04—01 基金项 目：国家质检总局科技专项(2O1OIKO13) 作者简介：李雯雯(1986一)，女，广西南宁人，硕士研究生，主要从事寄生虫分子生物学及免疫学研究。*通讯作者 EstablishmentandApplication0fPCR forDetection of0vinePulmonaryAdenomatosis ZH0U Yan-xi，SUJia，LIJing，LIU Xiao-hui，MAXue—an (VeterinarianInstituteofInnerMongoliaAgricultureUniwersity，Hohhot，InnerMongolia，010018，China) Abstract：0vinepulmonaryadenomatosisvirus(0PAV)couldbedetectedandidentifiedbyusingspecific PCR．ThespecificprimersweredesignedaccordingtOsequencesofOPAV inG