冷丙酮固定剂在骨髓活组织塑料冷包埋切片免疫组化染色中的应用研究.pdfVIP

陕西医学杂志 年 月第 卷第 期 和复发性急性白血病 .肿瘤防治研究, , : ? . :. 张之南.血液病诊断与疗效标准 . 版.北京:科学出 , , ,. ? ? ?? 版社, : 。 ?,, , . ?. , , : ? .., , : ? .张江舟,应 倩,边哗萍,等.吡喃阿霉素联合用药治疗恶性范自力,姚晨娇,钟美佳,等.联合用药治疗初治急性 淋巴瘤 例的近期疗效.实用肿瘤杂志, ,非淋巴细胞白血病临床观察.白血病 ?淋巴瘤, ,:?.:?. 张文兰,李志英,韩效林.方案治疗难治性急性非淋张小红.毗喃阿霉素联合预激方案治疗难治性急性髓系 巴细胞白血病初步疗效观察.中国实用医药, , 白血病临床观察 .中国医疗前沿, , : ? . :?., ,, .宋 强,屠振华,张明珙,等.吡喃阿霉素联合阿糖胞苷 , ? , 治疗难治性和复发性急性白血病 .中华血液学杂志,, :?. :收稿:? . , , 冷丙酮固定剂在骨髓活组织塑料冷包埋切片免疫组化染色中的应用研究 陕西中医学院第二附属医院 成阳 田亚宁 李 宏 王越月 何春玲 周智辉 杜 静 刘 芳 董昌虎△ 摘 要 目的:探讨骨髓活组织塑料冷包埋切片免疫组化染色技术在血液系统疾病诊断和 治疗中的应用。方法:在不脱钙的骨髓活组织塑料冷包埋切片上,采用经典免疫组化技术 染 色法。结果:冷丙酮固定剂在骨髓活组织塑料冷包埋免疫组化染色中,效果优于 固定液 .,一 ℃操作条件下免疫组化结果优于 ℃.。结论:冷丙酮固定骨髓活组织塑料 冷包埋免疫组化染色技术,结果稳定,特异性高,敏感性强。 主题词 骨髓检查 塑料包埋 免疫组织化学 【中图分类号】 . 【文献标识码】 【文章编号】 ? ? ? : .:.: ? , .,一 ℃ ,℃.. :,.. 骨髓活组织塑料包埋法用于免疫组化染色技术受 陕西省教育厅专项科研计划项目 到各种条件限制,目前国内开展很少。为使塑料包埋切 △通讯作者 片可顺利进行免疫组化染色,我们进行了相关研究,现 陕西医学杂志 年 月第 卷第 期 报道如下。 化学染色技术,检测结果在普通显微镜下清晰可辨,实 材料和方法 验检测程序稳定可靠,可进行特征性分类,为骨髓活组 一般资料 选择经骨髓活检检查,确诊的血液 织切片免疫组化染色技术应用于临床血液学诊断奠定 系统疾病患者 例,其中缺铁性贫血 例、巨幼细 了基础。 胞贫血 例、非特异性基质反应 例、骨髓纤维化 表 丙酮与 液固定骨髓活组织免疫组化结果比较 例、骨髓增殖性疾病 例、再生障碍性贫血 例、慢性 粒细胞白血病 例、多发性骨髓瘤 例。 实验试剂 冷丙酮固定液, 固定液,包埋剂甲液 甲基丙稀酸羟乙基酯单体、聚乙二醇、过氧 化苯甲酰 ,包埋剂乙液 ? 二甲基苯甲胺、聚乙二 合计 醇 ;、 、 、 抗体 由福州迈新生物技 表 ? ℃与一 ℃两种不同温度条件的免疫组化结果 术有限公司提供 。 标本制作方法 ①取材:用上海一针厂生产的 ? 型骨髓活检穿刺针× ,在髂后或 髂前上棘采取两步旋转进针法取出骨髓活组织标本。 ②固定:实验 组:将骨髓组织分别用 固定液和丙酮固定液,置于 ℃避光环境下固定 ~;实验 讨 论 组:将骨髓组织用冷丙酮固定液,分别置于 和~ 免疫组化染色技术的关键环节是防止细胞抗原的 避光环境下固定 ~。③浸泡:将分别固定之骨髓 人为损失,骨髓活组织塑料包埋切片进行免疫组化染 组织放人包埋剂甲液中,实验 组置一 ℃避光环境下 色时,省去石蜡包埋时脱钙、脱水、浸蜡、脱蜡等一系列 充分浸透 ~;实验 组分别置于 ℃和一 ℃避光 人为损失细胞抗原的步骤,也避免了苯类物质所造成 环境下充分浸透 ~。④包埋:按照甲液 :乙液一 的环境污染;尤为重要的是,整个过程不加温,细胞收: 之比例注入包埋盒内混匀,实验 组置于~ ℃ 缩小,细胞浆内颗粒、核等的细微结构清楚,容易识别 避光环境下待其凝固;实验 组分别置于 ℃和~ ℃ 粒、红、巨核及单核等各系不同阶段细胞,有利于血液 避光环境下待其凝固。⑤制片:制成 ~组织切 系统各类疾病的形态学分型。本研究在充分显示骨髓 片,裱片于用稀释多聚一 一赖氨酸处理的载玻片上,吹 活组织塑料包埋切片检查优势的同时,使整个过程处 干待用。抗原免疫组化染色步骤:采用经典免疫 于低温条件下,减少细胞抗原损失,使骨髓活组织冷塑 组化技术 法。 料包埋切片的免疫组化染色技术更加稳定可靠。 判断标准 、 定位于胞膜和胞浆外, 目前国内、国外常用的骨髓活组织塑料包埋切片, 、 定位于胞膜,棕褐色为阳性显色。在显微 因为甲基丙烯酸酯 等塑料包埋剂于室温下聚 镜下观测,计数