太湖水华藻的分离、鉴定和产毒特性.pdfVIP

太湖水华藻的分离、鉴定和产毒特性.pdf

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第40卷第6期 东 南大 学 学报 (自然科学版) VO1.40 No.6 2010年 11月 JOURNALOFSOUTHEASTUNIVERSITY (NaturalScienceEdition) Nov.2010 doi:10.3969/j.issn.1001—0505.2010.06.039 太湖水华藻的分离、鉴定和产毒特性 李小琴 杨 飞 尹立红 梁戈玉 李云晖 浦跃朴 (东南大学环境医学工程教育部重点实验室,南京 210009) 摘要:采用抗生素与倍 比稀释相结合的分离方法,对太湖梅梁湾水域水华的优势藻进行分离培 养;结合全细胞聚合酶链反应(PCR)、高效液相色谱法 (HPLC)和实时荧光定量 PCR(RTQ· PCR)法进行藻属与产毒特性分析.结果显示:自太湖梅梁湾水域成功分离获得2株藻株 TH1和 TH2,2株藻株藻蓝蛋白基 因中间序列(PC—IGS)、微囊藻 16SrDNA保守序列(Micr16srDNA) 扩增均为阳性,TH1的微囊藻毒素合成酶基 因B(mcyB)扩增为阳性,而TH2的mcyB扩增为阴 性.培养 15d的TH1藻株每 10 个藻细胞产生的总微囊藻毒素一LR(TMC.LR)为0.594Ixg,胞外 微囊藻毒素.LR (EMC—LR)为0.085 g,分别为铜绿微囊藻产毒株 的61.93%和 86.09%;TH2 藻株未检 出MC—LR.TH1藻株mcyB的mRNA相对表达水平为铜绿微囊藻产毒株的5.9%.结 果表明:分离 自太湖梅梁湾的2株藻细胞均为蓝藻门中的微囊藻属,其 中1株产毒微囊藻具有较 强的产毒能力,太湖梅梁湾水域有产毒微囊藻污染. 关键词 :富营养化;藻;全细胞 PCR;高效液相色谱法;微囊藻毒素;太湖 中图分类号 :X171 文献标志码 :A 文章编号 :1001—0505(2010)06—1332-05 Separation,identificationandtoxigenicityofalgae inbloom ofM eiliangBayofLakeTaihu LiXiaoqin YangFei YinLihong LiangGeyu LiYunhui PuYuepu (KeyLaboratoryofEnvironmentalMedicineEngineeringofMinistryofEducation,SoutheastUniversity,Nanjing210009,China) Abstract:Algaewereisolatedfrom MeiliangBayofLakeTaihu bydilutionculturemethodandthe antibioticswereappliedtoinhibithtegrowthofbacteria.Thegenusandtoxigenicityofalgaewerean— alyzedbywhole—cellpolymerasechainreaction (PCR),highperformanceliquidchromatorgaphy (HPLC)andreal—timequnatitativePCR(RTQ—PCR)method.1]heresultsshowthattwoalgaestrains aresuccessfullyisolatedfrom MeilinagBayofLakeTaihubloom namedasTH1nad1H2.ThePhyco- cyaninintergenicspacer(PC—IGS)geneand16SribosomadeoxyribonucleicacidofMicrocystis(Micr 16SrDNA)genearema plifiedaspositiveinbohtalgaestrainsnadhteMicrocystinSynthetaseBgene (mcyB)isonlyfoundinTH1straininwhole—cellPCR.Microc

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