高效液相色谱-串联质谱法测定沉积物中孔雀石绿及其代谢物.pdfVIP

第27卷增刊 分析试验室 Vo1．27．Supp1． 2008年 l2月 Chin~ JournalofAnalysis[．a[~ratory 2008一l2 高效液相色谱．串联质谱法 测定沉积物中孔雀石绿及其代谢物 那广水 ，李红霞 ，周传光 ，孙 茜 ，姚子伟 (I．国家海洋环境监测中心，大连 116023；2．大连水产学院，大连 116023) 摘 要：建立了沉积物中孔雀石绿及其代谢物(隐性孔雀石绿)的高效液相色谱 ． 串联质谱检测方法。称取 2g沉积物样品，以乙腈和 CH2 超声萃取，旋转蒸 发浓缩后，以30％甲醇定溶，经O．45a／n滤膜过滤后，应用高效液相色谱．串联 质谱测定沉积物中孔雀石绿及其代谢物残留量。本方法MG和LMG线性范围为 O．5—100v-g／L，相关系数为O．9982和O．9976，仪器检 出限为0．2×10～，定量限 为O．5x10一，MG回收率为 44．5％一66．7％，LMG回收率 31．4％ 53．3％，方 法检出限为2．0n g。该方法适用于沉积物中痕量孔雀石绿及其代谢物的检测。 关键词：孔雀石绿；隐性孔雀石绿；高效液相色谱．串联质谱；沉积物 孔雀石绿 (MalachiteGreen，MG)，分子式： 1 实验部分 C ，分子量：364．92，别名碱性孔雀 (石) 1．1 仪器与设备 绿、碱性绿、盐基块绿、苯胺绿，为金属光泽的深 FirmiganTSQQuantumDiscoveryMAX：带 自动 绿色结晶状固体，极易溶于水和乙醇n]。孔雀石绿 进样器的FirmiganSurveyor液相色谱系统 (Thermo 是一种三苯甲烷类化工染料，以往仅在制陶业、 Electron，USA)和 FinniganTSQQuantumDiscovery 纺织业、皮革业、食品着色剂、细胞化学染色剂和 MAX三重四极杆质谱分析仪。SymmetryC。8柱 (3．5 指示剂等方面有所使用心J。自1933年起孔雀石绿 a／n，2．1llm-i×150rFlln，Waters)。 开始作为驱虫剂、杀菌剂、防腐剂在水产养殖中 试剂：孔雀石绿、隐性孑L雀石绿标准品和D6．孑L雀 出现，而后因为具有价格低廉、效果显著等优点， 石绿(纯度99．9％，Sigma公司)；甲醇(I-IPLC级， 被广泛应用于预防与治疗各类水产动物的水霉病 Tedia，USA)；水 (MiUipore系统产生的超纯水)； 和对原虫的控制Dj。但随着研究的深人，孔雀石绿 CH2a2(ttPLC级，Tedia，USA)；乙腈 (HPLC级， 潜在的致癌、致畸、致突变等毒副作用受到广泛 Tedia，USA)氮气 (纯度 99．99％)；氩气 (纯度 关注，我国于2002年5月将孔雀石绿列入 食《品动 99．999％)。 物禁用的兽药及其化合物清单》中，但由于孔雀石 1．2 实验方法 绿抗菌效果好、价格低廉、对其毒副作用的宣传 1．2．1 标准溶液的配制 准确称取适量的MG和 力度不够等原因，在水产养殖中仍有违规使用的情 LMG，用 甲醇配置成 100 ·mL的标准储备液， 况[4]。研究表明，70％以上的饲料中添加的渔业养 一 20c=【避光保存；标准中间工作液：使用 (甲 殖用药都沉积于底栖环境，从而半衰期延长，危害 醇)：(水)=50：50配制。 加大5『。本研究针对沉积物，建立了MG及其代谢 1．2．2 试剂配制 20％盐酸羟胺溶液：20g盐酸 物隐性孔雀石绿 (Leucomalachitegreen，LMG)的痕 羟胺，加水溶