日本血吸虫SJCHGC02377蛋白部分片段的克隆与表达.pdfVIP

湖南师范大学学报 (医学版 ) 　2008, 5 ( 4 ) ( ) 24 J Hu a N orm al U iv M ed Sci 3 日 本 血 吸 虫 SJCHGC02377蛋 白 部 分 片 段 的 克 隆 与 表 达 袁仕善 ,孙文霞 ,杨盛清 ,唐小异 (湖南师范大学医学院分子生物学研究室 ,湖 南 长沙 　4 10013) 　　 [摘要 ] 　目的:克隆和表达 日本血吸虫 SJCH GC02377蛋 白。方法 :采用 R T2PCR 从 日本血吸虫成虫总 RNA 中扩增出编 码 SJ CH GC02377 蛋白的基因片段 ;经克隆和测序分析后 ,亚克隆至表达载体 p ET223a ( + ) ,转化大肠埃希菌 BL 21, 菌落 PCR 和双酶切鉴定 ;阳性 菌株 经 IPTG诱 导表达 SJ CH GC02 377 蛋白部分 片段 ,亲和层 析予 以纯化 。结果 : RT2PCR 扩增 出 SJCH 2 GC02 377 蛋白基因片段 ;获得的阳性克 隆序列与 Ge Ba k 中登录 的日本血 吸虫 SJ CH GC02 377 蛋白的基 因序 列一致 ; SJCH 2 GC02 377 蛋白基因被亚克隆到原核表达载体 p E T22 3a ( + ) ,在 BL 21 中获得了表达 ,表达的蛋白经 亲和层 析获得纯化 。结论 : 成功构建了日本血吸虫 SJ CH GC02 377 蛋白的重组表达质粒 ,在大肠埃希菌中获得表达 。 [关键词 ] 　日本血吸虫 ; SJ CH GC02 377 蛋白;克隆;表达 [中图分类号 ] S85215　　　 [文献标 识码 ]A 　　　 [文章编号 ] 167 3 - 0 16x ( 200 8) 04 - 0024 - 04 C lo i g a d Expr e ssio of Sch istosom a J apo icum Tr u ca ted SJCH GC 02377 Pr ote i YUAN Sh i2sha , SUN W e 2x ia, YAN G She g2q i g, TAN G X iao 2yi (D ept. of B ioch em ist ry, m ed ica l co lleg e of Hu a N om a l U iversity, Ch a g sha 4100 13, Chi a) [ Ab str a ct] O bj ect ive　To clo e a d exp ress Sch istosom a japo icum SJCH GC02 377 p rotei . M ethod s　Th e ge e e cod i g Sch istosom a ja po icum SJCH GC0237 7 p rote i w as amp