蒙古冰草Lea3抗旱基因片段的分离与鉴定.pdfVIP

n C T _ a0RICULTURAE 华北农 学报 ·2008，23(6)：64—6-7 BOREnLl-SlHICn 蒙古冰草 Lea3抗旱基因片段的分离与鉴定 赵 彦 2，云锦凤 ，石凤敏 ，高翠萍 (1．内蒙 占农业大学 生态环境学院，内蒙古 呼和浩特 010018；2．内蒙古农牧业科学 院，内蒙古 呼和浩特 010031) 摘要 ：研究旨在利用 同源序列法分离蒙古冰革抗旱基因同源片段。根据已知禾本科植物抗旱基因 n第 3组的 保守区段设计一对简并引物 ，采用 PCR方法对蒙古冰草幼苗的基因组DNA进行扩增。获得 了1个蒙古冰草的抗旱基 因Lea3基 因片段 ，长度为497bp，包含 124bp的非翻译区，共编码 124个氨基酸。核苷酸序列分析表明，该序列与小麦 抗旱基因LEA第 3组的 n6J9同源性为93％，与小麦受 ABA诱导的 WRAB1基 因同源性为 93％；与一个来源于玉米 mRNA的逆境胁迫基 因克隆9124同源性为 96％；与大麦受 ABA诱导的pHVA1基 因同源性为 94％；与大麦 HVA1基因 同源性为91％。Southern杂交表 明该基因在蒙古冰草基因组 中以基 因家族形式存在。 关键词：蒙古冰草 ；Lea基 因；同源序列 中图分类号 ：S543 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000—7091(2008)06—0064—04 Isolation and CharacterizationofaLea3 GeneFragment from Agropyronmongolicum Keng ZHA0Yan一，YUN Jin—feng ，SHIFeng—min ，GAO Cui—ping (1．CollegeofEntironment，InnerMongoliaAgriculturalUniversity，Huhhot 010018，China； 2．InnerMongoliaAcademyofAgricultureandAnimalHusbandrySciences，Huhhot 010031，China) Abstract：Inthisstudy，droughtresistancegenehomologyfragmentfrom Agropyronmongolicum Kengwasisolated usinghomoloyg—basedmethod．A pairofdegeneracyprimerswasdesignedaccordingtotheaminoacidconservedregionsof thecloned Gramineaeplantgroup3Leagenes，Onedroughtresistancegenehasbeenobtained．bythepolymerasechain reaction(PCR)usingthegenomicDNA ofA．mongolicum Kengastemplate．ItwasnamedasLea3．Thenucleotidese— quenceswas497bp，including 124bpuntranslatedregion，andencoded 124aminoacids．Homoloyg research showedthat thenucleotidesofLea3was93％ identicaltowheatgroup3 Lea gene Wrabl9，93％ identicaltowheatgeneWRAB1． 96％ identica1totheclone9124froIllthemRNA ofmaize，94％ identicaltobarleygenepHVA1．and91％ identicalto barleygeneHVA ．theanalysisofitssecondarystructureandhydrophilicity indicatedthat2-helixeswerepredominant featureofsecondary structure，andthisgenehadhighhydrophilicproperly．TheresultofSouthernblotanalysisrevealed th