臭灵丹中总黄酮提取工艺研究.pdfVIP

玉溪师范学院学报( 第24卷) 2 008年第8期J oumal of Yu x i Normal Uni ver si t y V01 ．24 No ．8 Aug ．2008 专生物与化学研究夺 臭 灵 丹 中 总 黄 酮 提 取 工 艺 研 究 杜松文彭宝权 ( 玉溪师范学院资源环境学院。云南玉溪65 100) [ 关键词】臭灵丹；总黄酮；超声波 [ 摘要] 对超声波方法和传 统方法提取臭灵丹中的总黄酮进行试验比较 ，同时对影响超 声波提 取臭灵丹 中总黄酮的多个因素进行正交实验分析 ．结果表 明：超声提取总黄酮效果较好 ，其最佳 提取条件为：90％乙醇，浸提温度75℃，料液比1：12 ，提取时间2 0 mi n ，在此条件下，总黄酮 的 提取率可达到95．4 ％． 【 ‘作者简介] 杜松文，本科生，主要从事生物学研究． [ 中图分类号] R284 ．2[ 文献标识码] A[ 文 章编号] 1009- 9506( 2008) 08- 0016—04 臭灵丹为菊科六棱菊属草本植物，是一味具有抗菌消炎、清热解毒等功效的常用中草药．⋯该植物鲜 叶捣碎还可 以作外敷药 ，用于治疗烫伤、芥疮、毒蛇咬伤、跌打损伤、去毒拔脓及治疗腮腺炎等病，而其提取 物则具有较好的祛痰作用，对实验性急性支气管炎也有一定的疗效，并对急性淋 巴细胞型 白血病、急性粒 细胞型 白血病及急性单核细胞型 白血病患者的血细胞脱氢酶均具有较强的抑制作用．臭灵丹中含有多种 有效化学成分，其中黄酮类化合物是含量比较多的一类． 【2 o对于臭灵丹，前人研究其化学成分所做的工作 较多，而对其提取工艺的研究却甚少 ，本研究则主要就臭灵丹中总黄酮的提取工艺进行试验． 1 实验仪器、试剂及材料 实验仪器KQ一5200超声波清洗器、721型分光光度 计、SHB一Ⅲ循环水多用真空泵． 实验试剂0．05 m．Jmi 芦丁、5％NaN02、5％h i 2( S04 ) 、4 ％NaOH及乙醇( 浓度分别为 ：9 5％、7 5％、 60％、50 ％) ． 实验材料臭灵丹叶片，采于2007年7月 ． 2实验方法 2 ．1 黄酮含量的测定方法 2 ．1．1标 准曲线的制备 ‘】 精确称取芦丁5 mg ，将其溶于100 mL 60 ％乙醇中，配制成0．05 mg ／t nL的芦丁标准液．分别量取储备 J 6 杜松文彭宝权：臭灵丹 中总黄酮提取工艺研究 液0 mL、1 mL、2 mL、 mL、4mL、5 mL于2 5 mL刻度试管中，分别加入60 ％乙醇5 mL、4 mL、 mL、2 mL、 1 mL、0 mL及5 ％的NaN02溶液O． mL，放置5 mi n，加入5 ％的AI ( N0 ) 溶液0 ． mL，放置6 mi n后再 加入4 ％的NaOH溶液4 mL，最后，用0 ．4 mL蒸馏水补至10 mL，放置15 mi n ，测OD50 6．结果如表1所示 ： 表1 标准曲线操作 回归方程：Y=1．072 菇+0．00 6 l ，R=0 ．999 5 ． 2 ．1．2测定波长的选择 取标准储备液1 mL按标准 曲线操作，在紫外分光光度计上进行全波长扫描，总黄酮反应物在506 nn l 下有最大吸收峰 ．因此 ，定5 06 nl n为测定波长． 2 ．2提取方法比较 传统提取方法以回流和冷浸为主[4 。】：在50。C下，料液比1：20，60 ％的乙醇回流 ．本实验先选用浸 提、回流、超声波 种方法和不 同溶剂( 水、乙醇) 、不 同提取时间两个因素考虑正交实验 因素 ．每组实验设 平行对照，水提取和醇提取在时间因素上设l h和2 h两个水平，以试验性考虑时间因素 的影响作用． 2．2．1 水浸提取 ①取原料5 g，加入120 mL蒸馏水，置于90 。C的水中，浸提1 h ，设一平行实验，另加一对照实验，抽 滤，量出滤液体积．②取滤液1 mL，稀释10倍，取l zl l L制作标准曲线．③按照标准曲线操作 ，测OD50 6 nm 下的光吸收