傅里叶变换红外光谱用于胆囊癌细胞及其细胞核结构的基础研究.pdfVIP

第29卷，第7期 光谱学与光谱分析 200 and 9年7月 SpectroscopySpectralAnalysis July，2009 傅里叶变换红外光谱用于胆囊癌细胞及其细胞核结构的基础研究 孙学军1，孙丰雷1，杜俊凯1，潘庆华2，张元福2，徐怡庄2，石景森h，吴瑾光2 1．西安交通大学医学院第一附属医院普外科，陕西西安710061 2．北京大学化学与分子工程学院，北京100871 摘要应用傅里叶变换红外光谱(FTIR)对体外培养胆囊癌细胞、细胞核进行检测，对照胆囊癌组织光谱 特征，研究胆囊癌细胞株及细胞核的光谱表现；为红外光谱法诊断胆囊痛奠定细胞学基础。应用美国Nieo- let(尼高力)公司5700-Ⅱ型红外光谱仪，组织标本放置于0MNIC采样器表面进行检测，记录红外光谱；体外 培养胆囊癌细胞株(GBC-SD)及提取的细胞核涂于欧米采样器表面进行红外检测，记录红外光谱，得到时间 轴卜体外培养细胞株及细胞核的光谱图；选择特征性光谱与胆囊癌组织光谱进行比对。结果发现胆囊癌细 胞株红外光谱特征与相应癌组织光谱特征存在异同。从而可得出结论：将体外培养肿瘤细胞株及提取的肿 瘤细胞核，进行FTm测定是行之有效的细胞红外光谱检测手段，能得到体外培养细胞的红外谱图；胆囊癌 组织所表现的红外光谱特征具有胆囊癌细胞本身的红外光谱特征，同时也具有组织自身的复杂特点；FTIR 为应用于胆囊癌的定性诊断提供了更加丰富的细胞学基础。 关键词傅里叶变换红外光谱；胆囊癌；细胞株；细胞核 中图分类号：0657．3文献标识码：A DOI：10．3964／j．issm1000-0593(2009)07—1750-04 外光谱对胆囊癌组织，细胞株及其亚细胞结构细胞核进行检 引 言 测研究，期望为肿瘤组织的定性诊断提供更丰富的细胞学基 础。 原发性胆囊癌是胆道系统最常见的恶性肿瘤，近年来发 病率日益增高。该病缺乏典型的临床表现，一经发现多属中 1材料和方法 晚期，手术切除率低，术后5年生存率不到5％，而早期原发 性胆囊癌术后5年生存率甚至可达100％。因此，早期诊断1．1标本取材和处理 是提高疗效、改善预后的关键。 所有组织标本为西安交通大学医学院第一附属医院外科 手术切除的胆囊癌，征得患者家属同意，手术切除后立即取 自1985年Benedetti等首次将傅里叶变换红外光谱用于 白血病病人淋巴细胞的研究以来，该技术在肿瘤领域的研究 材。用无菌蒸馏水清洗干净标本后，取大小为1emX1cmX 日益受到人们的重视。红外光谱是分子结构的灵敏探针，能 1cln的组织两块，均取自癌中心部位，一块放入液氮中冻存 够在分子水平上对肿瘤进行研究，目前已经成为生物医学领 备用，一块用lo％的福尔马林溶液固定，石蜡包埋，常规病 域的热门话题。傅里叶变换红外光谱已用于宫颈癌、结肠 理检测。 癌、肝癌、皮肤癌、乳腺癌、口腔鳞状细胞癌、胃癌等组织的 1．2胆囊癌细胞株的培养及其细胞核的制备 研究，并获得了一些有意义的信息；在细胞水平已有研究报 胆囊癌细胞株(GBC-SD)由西安交通大学医学院中心实 道【14]，但在哑细胞结构研究未见有报告。而肿瘤细胞是肿 瘤组织的主要组成成分，并决定着肿瘤的生物学特点，细胞 血清，青霉素和链霉素各100U·mL_1)中，置37℃，饱和 恶变的一个重要特征就是由于DNA的大量复制而导致其在 湿度，5％C02的培养箱中进行培养，待细胞进入对数生长 细胞核内含量增加，细胞核体积增大和核浓染是在HE染色 期后，收集细胞，应用细胞核制备试剂盒提取所需癌细胞核 光镜下判断其良恶性的重要指标，本实验应用傅里叶变换红 以备检