c-Flip的基因表达在肝癌细胞对TRAIL诱导凋亡耐受中的作用.pdfVIP

凌 洪等 cFlip的基因表达在肝癌细胞对 TRAIL诱导凋亡耐受中的作用 第 7期 · 597 · doi：l0．3969／j．issn．1000-484X．2011．07．005 c．Flip的基因表达在肝癌细胞对 TRAIL诱导凋亡耐受中的作用① 凌 洪 吕国悦② 郝恩源② 耿亚军② 陈 儇② (湖南衡阳南华大学附属第一医院急诊外科，衡阳421001) 中国图书分类号 RM 文献标识码 A 文章编号 1000．484x(2011)0r7．059，7．05 [摘 要] 目的：观察 c—Flip基因的表达变化在肝癌细胞对 TRAIL诱导凋亡耐受中的作用。方法：以肝癌细胞 HepG2、 Hep3B为研究对象，制备c—FlipsiRNA的细胞模型，应用流式细胞仪分析两种细胞模型对TRAIL作用后细胞周期的变化，Western blot检测其在c．Flip基因沉默前后凋亡信号传导蛋白Caspase．8、Caspase-3等的表达变化。结果：转染 c．FlipsiRNA后，细胞恢复 了对 TRAIL诱导凋亡的敏感性 ，当TRAIL浓度为 100ng／m]时，HepG2及 Hep3B转染组的细胞生存率为57．34％±6．13％和 43．98％±4．54％，显著低于对照组的96．44％±5．43％和 101．85％±6．41％(P0．01)；细胞生存周期 SubG1期为 74．68％± 6．95％和78．43％±7．64％，显著高于对照组的0．78％±0．o7％和3．62％±0．38％(P0．01)，转染组 TRAIL单独作用，可以引 起 HepG2siRNA及 Hep3BsiRNA凋亡传导通路上传导蛋白Caspase一8、Caspase．3的裂解。结论：肝癌细胞对 TRAIL诱导凋亡的耐 受可能与其传导通路上c—Flip蛋白的表达相关，抑制其表达可以导致凋亡传导蛋白Caspase一8、Caspase一3的裂解，促使凋亡的发 生，恢复肝癌细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性。 [关键词] 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体；肝细胞肝癌；细胞内抑制蛋白；凋亡 Theexperimentalstudyofc-FlipgeneexpressioninTRAIL-inducedapoptosistoler- anceinhepatocellularcarcinomacell LING ，，JGuo-Yue，HAOEn-Yuan， GYa—Jun，CHENXuan． EmergenceDepartmentoftheFirstHospital ofNanhuaUniversity，Hengyang421001，China [Abstract] Objective：Todiscusstheeffectofc—FlipgeneexpressioninTRAIL-inducedapoptosistoleranceinhepatocellularcarcinoma cel1．Methods：Wesethepatocellulm-carcinomacellHepG2andHep3Bastargetsandpreparedcellsmodelofc-FlipsiRNA，cellcyclevariation of thetwotypesofcellmodelswereanalysedbyFlowcytometryafterbeingtreatedbyTRAIL，theexpressionofsignal~ansducfionproteinCas— pase一8，Caspase-3，DFF-45weredetectedbyWesternblotbeforeandafterTIPgenesilencing．Results：ThesensitivityofHepG2nadHeo3Bto TRAILwasregmnedafterc-FlipsiRNAtransfecfion．ThecellviabilityofHepG2nadHeO3Bwe 57．34％-4-6．13％and43．98％±4．54％in siRNAgroups，therewasasignificantdifferencecompraedwiht96．44％ ±5．43％ and101．85％±6．41％ incontrolgroups(P0．01)．The SubG1percentofcellcyclewere74．68％ ±6．95％ and78．34％ ±7．64％ ．a