氰戊菊酯特异性人工抗原的合成与鉴定.pdfVIP

第 3期f总第 166期) 农产品加工 ·学刊 No．3 2009年 3月 AcademicPeriodicalofFarmProductsProcessing Mar 文章编号：1671～9646(2009)03—0005—05 氰戊菊酯特异性人工抗原的合成与鉴定 魏新林 ，刘 莹 ，张少恩 ，王元凤 (1．上海师范大学 生命与环境科学学院，上海 200234；2．杭州南开 日新生物科技有限公司，浙江 杭州 310051) 摘要：基于农药小分子人工抗原设计合成的基本原则，以氰戊菊酯的特征菊酸部分——氰戊菊酸作为半抗原，与载 体蛋白BSA偶联合成了氰戊菊酯免疫特异性人T结合抗原，并对抗原合成条件进行了探索。结果表明，抗原合成反 应温度以室温为宜 ，偶联时缓冲液的最佳pH值为 8．0；通过紫外分光光度仪扫描，合成抗原的紫外图谱相对于半抗 原和载体蛋白均发生了偏移，表明偶联成功；SDS—PAGE电泳结果表明，合成产物蛋白条带明显在载体蛋白条带之 后，即合成产物的分子量大于相应的载体蛋白分子量，从而判定偶联是成功的。 关键词：氰戊菊酯；人工抗原；半抗原；偶联 中图分类号：$482 文献标志码：A SynthesisandIdentificationofFenvalcrateSpecificArtificialAntigen WeiXinan 。KuYing，ZhangShaoenz，WangYuanfeng (1．SchoolofLifeandEnvirnoment，ShanghaiNormalUniversity，Shanghai200234，China； 2．NankaiBiotechnologyLimitedcompany，Hangzhou，Zhejiang310051，China) Abstract：Thisstudyhasdevelopeda synthesismethodforfenvalerateimmuneantigenbased onthe synthesisprincipleof pesticidewith smallmolecularweight．The study utilized the specific acid partoffenvalerate asthe hapten which was conjugatedtoacarrierprotein-BSA．Thesynthesisconditionshavealsobeeninvestigated，Results：Thebestreaction temperaturewasatroom temperatureandtheoptimum pHofrconjugationwasat8．0．Theuv—spectrogram offenvalerate artificialantigenwasdifferentfrom thatofhapten and carrierprotein and the electrophoretogram both indicated thatthe artificialantigenweresynthesizedsuccessfully． Keywords：fenvalerate；artificialantigen；hapten；conjugation 本高，分析速度慢，很难达到快速、简便和现场检测 0 引言 的实际要求，更难以适应大量复杂样品的检测。已报 氰戊菊酯 (Fen)是拟除虫菊酯类农药的一种 ， 道的氰戊菊酯残留量测定方法有 ：①气相色谱 (GC) 也是 目前使用最普遍、蔬菜农药残留量检测中检出率 法。GC法使用高灵敏度的电子捕获检测器，因而对 和超标率最高的一类l1l2]。拟除虫菊酯具有高效、低 样 品的净化要求严格 ，并增加 了分析流程 的