食用蕈菌的基因工程研究现状.pdfVIP

维普资讯 第 22卷 第 6期 龙岩师专学报 2004年 12月 Vo1．22 No．6 Journal of Longyan Teachers College December 2004 食用蕈菌的基因工程研究现状 邱龙新 摘要 ：综述了食用蕈茵DNA特征的确定、基因的克隆、克隆载体的构建及转化系统的建立方面的研究现状。 关键词：食用蕈茵；基因工程；基因克隆；转化系统 中图分类号：Q93—3 文献标识码：A 文章编号：1672—044X(2004)06—0061—04 真菌基因工程以较为简单的酵母菌发展较快，丝状真菌 等 以RAPD标记为主，辅以RFLP、同工酶 、交配因子表型标 虽然 比较复杂，但由于其在理论和实践上的重要性，近年来 记，构建 了糙皮侧耳的遗传图谱 ，得到了 189个位点的遗传 也在迅速地发展。虽然食用蕈菌的基因工程研究起步较晚。 图谱 ，分属 l1个连锁群 ，该 图谱覆盖 的基因组总长度为 目前仍由于缺乏合适的载体，不能发展有效的克隆体系而受 1000．7cm，标记间平均距离为5．3era。相信随着 DNA标记技 到一定的限制 ，但基因操作将给食用蕈菌的遗传育种研究注 术的发展 ，将有越来越多的食用蕈菌的遗传 图谱被构建出 入无限的生机 ，具有美好的前景，同时食用蕈菌可作为一种 来，图谱上标记的密度也会越来越高。 新的易培养又更安全的基因工程受体菌，因此食用蕈菌的基 关于食用蕈菌的线粒体基因组的研究，目前仍处于基础 因工程研究受到了广泛的重视。近年来在食用蕈菌 DNA特 研究阶段。食用蕈菌的mtDNA比一般真菌的要大．通常大于 征的确定 、基 因的克隆、克隆载体的构建及转化系统 的建立 几十Kb，最大的达 176．3Kb，是在大肥菇 中发现的，这是 目前 方面进行了一些研究。 在真菌中发现的最大的mtDNA。这些mtDNA多数为环形 ．也 l 食用蕈茵 DNA特征的确定 有呈线形结构 的。 早期蕈菌的分子生物学研究主要集中在两种传统的模 在食用蕈菌中，除了mtDNA外 ，在大肥菇、尖顶羊肚菌、 式蕈菌——裂褶菌和灰盖鬼伞 中，现逐步扩展到食用蕈菌 侧耳和香菇中还发现了类质粒DNA(plDNA)。这些 plDNA有 中。食用蕈菌子实体的发生是由形态发生因子和不亲和因子 的与核 DNA有关 ，有的与mtDNA相关 ，有的则与两者都无相 同时决定的，较为典型的是Esser等提出的模型 l『·，即子实 关性。这些食用蕈菌线粒体中的plDNA均呈线形 ，多数在其 体的发育是由多个基因控制的，开关基因Su使菌丝体发展 末端有反向重复序列I7]。 成网状 ，其等位基因Su’起阻遏作用，只有当子实体构造基因 2 食用蕈菌中基因的克隆 Ii、子实体发育基因fb及 Su同时存在时才能产生正常的子 食用蕈菌中一些与生理生化特性有关的基因需要得到 实体。因此 ，靠引入一小段外源 DNA来改造由多基因控制的 克隆并测序，特别是一些重要的基 因，如纤维素酶基因。很多 一 个菌株的生产性能，具有相当的难度 ，必须在食用蕈菌的 食用蕈菌具有较强的纤维素酶活性 ，因而食用蕈菌纤维素酶 基因图谱分析方面进行更多的基础研究。 基因的克隆备受重视．已有一些成功的研究。 RFLP技术首先被用于人类基因图谱的分析，现在 ，在食 食用蕈菌中许多基 因往往 能通过携带该突变等位基因 用蕈菌的基因作图、物种鉴定、居群遗传学与系统发育系统 菌株的一些有意义的特性而加 以鉴定，因此 ，常常需要克隆 学等方面也得到了广泛应用。在上述方面广泛应用于食用蕈 已通过突变鉴定的基 因。在许 多真菌中．利用含有野生型