农杆菌介导的VgDGATla基因棉花茎尖转化体系优化研究.pdfVIP

浙江大学学报 (农业与生命科学版) 39(3)：253～260，2013 JournalofZhejiangUniversity(Agric． LifeSci．、 http：／／www．journals．zju．edu．cn／agr E-mail：zdxbnsb@zju．edu．cn DOI：10．3785／j．issn．1008—9209．2012．11．093 农杆菌介导的VgDGATla基因棉花茎尖转化体系优化研究 王安可 ，何秋伶 ，潘 晶晶，孙英超 ，祝水金 ，陈进红 (浙江大学农业与生物技术学院农学系，浙江省作物种质资源重点实验室 ，杭州 310058) 摘要 为 了将斑鸠菊 (Vernoniagalamensis)二酰甘油酰基转移酶基 因(vgDGAT1a)导入棉花 ，创制转基 因高油棉 花种质，优化建立农杆菌介导 的棉花茎尖转化体 系，以 中‘棉所 49’茎尖为外植体 ，以H ￡Ⅱ基 因为筛选标记， vgDGATla为 目的基因，用农杆菌介导法，研究外植体培养时间、浸茵侵染时间、共培养时间及吸光度A 值等对 棉花茎尖转化 的影响．结果表 明，在外植体培养 3～5d、生长点纵切 、茵液吸光度 A。o值 0．6～0．9、浸茵 4O～6O min、浸菌后暗培养 1d和使用MSB+活性炭 1g／L+头孢霉素400mg／L作为生根培养基的条件下能高效获得再 生转化植株 ，从而为转基 因高油棉花种质的创制提供 了一种有效的方法． 关键词 棉花；茎尖培养；农杆菌介导转化；斑鸠菊二酰甘油酰基转移酶基因；种子舍油量 中图分类号 Q 785；S562 文献标志码 A ImprovedAgrobacterium—mediatedtransformationprotocolforVgDGATla genebased on shoottip cultureofcotton．JournalofZhejiangUniversity(Agrie．＆ LifeSei．)，2013，39(3)：253—260 WANGAnke，HE Qiuling，PAN Jingjing，SUN Yingchao，ZHU Shuijin，CHEN Jinhong (ZhejiangKey LaboratoryofCropGermplasm，DepartmentofAgronomy，CollegeofAgricultureandBiotechnology，Zhejiang University，Hangzhou310058，China) Summary Inpasttwodecades，abundantresearcheshavebeenpublishedontransformation，regeneration，and geneticenhancementofcotton，especiallyGossypium hirsutum ．Generally，genesconferringagronomicadvantages havebeen introducedinto plantsviaAgrobacterium—mediationorparticlebombardment，and thenthetransgenic plantsare regenerated through somatic embryogenesis from callus．However，the embryogenic callus～based regenerationisdifficultandtime—consumingincotton．Therefore，itisnecessarytoestablishaneffectivesystem for theAgrobacterium—mediatedgenetictransformationofshoottipincotton． Triacylg1ycer01s(TAG)areaheterogeneousgroupofmoleculeswithaglycerolbackboneandthreefattyacids attachedbyesterbones．D