进出口化妆品中腐败葡萄球菌的检测方法 编制说明.docVIP

《化妆品中腐生葡萄球菌检验》行业标准 编制说明 工作简况：标准编写的依据、必要性，起草工作的主要过程，起草小组（或起草人）所做的工作2010年12月，美国FDA发布进口预警，在中国出口的手提套装的口红中发现腐生葡萄球菌，从而实施自动扣留。引起化妆品腐败的革兰氏阳性葡萄球菌不仅有致病性金黄色葡萄球菌，还包括腐生葡萄球菌、表皮葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、人葡萄球菌、中间葡萄球菌等重要的条件致病菌。腐生葡萄球菌的检测目前国内还没有成文的标准，因此，为保障消费者安全，强化化妆品质量控制，制定腐生葡萄球菌的检测方法，加强对化妆品中易污染菌群的调查，丰富检验检疫行业标准体系，拓展化妆品安全卫生监控领域，具有十分重要的意义。 本项目项目编号标准编写原则和确定标准主要内容（如技术指标、参数、性能要求、试验方法、检验规则等）的依据（包括试验、统计数据）。葡萄球菌属（Staphylococcus）是一群革兰氏阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状。多数为非致病菌，少数可导致疾病。葡萄球菌是最常见的化脓性球菌，是医院交叉感染的重要来源。GB/T 7918.1《化妆品微生物标准检验方法　总则》，ISO22718-2006《Cosmetics- Microbiology-Detection of Staphyloccocus aureus 》（化妆品微生物检验 金黄色葡萄球菌检验）和国外部分大企业标准。 样品前处理部分，经比较国家标准、ISO标准以及其他企业标准，防腐剂中和通常采用传统的卵磷脂和吐温80，分散剂采用液体石蜡或辛苯聚醇-9曲拉通X-100 改良血琼脂平板 金黄色葡萄球菌显色培养基 腐生葡萄球菌 灰色 蓝绿色 表皮葡萄球菌 柠檬色，少数灰白色，无溶血。 白色 沃氏葡萄球菌 灰色 白色 再用TSA 纯化后，腐生葡萄球菌多数呈柠檬色。 本标准试验采用的菌株有：腐生葡萄球菌标准菌株2株，分别为ATCC49453以及ATCC15305，分离株10株（分别由苏州大学2株、南京农业大学2株、本室留存2株，苏州大学附属第二人民医院4株），表皮葡萄球菌标准菌株1株，为ATCC12228，本室留存分离株1株。金黄色葡萄球菌16株，其中标准菌株2株，为ATCC6538,ATCC25923,其他为本室留存分离株。沃氏葡萄球菌本室留存分离株4株。本室留存中间葡萄球菌1株，山羊葡萄球菌1株，人葡萄球菌1株。这些菌株均经过VITEK2 compact微生物自动鉴定仪检测鉴定，符合可能性在95%以上。标准菌株均为符合可能性99%。 同时，考虑到各实验室仪器设备和条件的不同，选择了生物梅里埃的API Staph 生化鉴定试剂条,其鉴定结果与VITEK 2 compact鉴定结果一致。 另外，普通生化试验也同时进行。根据文献查阅和厂家各种成品生化试剂的收集，我们选择以上菌株进行了生化反应测试，经过三次平行试验，主要生化测试主要结果如下表。 序号 项目 腐生葡萄球菌ATCC49453 腐生葡萄球菌ATCC15305 金黄色葡萄球菌ATCC6538 表皮葡萄球菌ATCC12228 1 西蒙氏枸橼酸盐 — — — — 2 乳糖 — — + + 3 卫矛醇 — — — — 4 麦芽糖 + + + + 5 5%乳糖 + — + + 6 鼠李糖 — — — — 7 酚红葡萄糖肉汤 + + + + 8 棉子糖 — — — — 9 纤维二糖 — — — — 10 松三糖 — — — — 11 胆汁肉汤 — — — — 12 木糖 — — — — 13 酒石酸盐 — — — — 14 丙二酸盐 — — — — 15 七叶苷 — — — — 16 葡萄糖（产气） + — + + 17 水杨苷 — — — — 18 溶菌酶营养肉汤 — — — — 19 尿素酶 + + — + 20 硝酸盐肉汤 — — — — 21 甘油 — — — — 22 色氨酸肉汤 — — — — 23 蔗糖 — + + 24 甘露醇b — — + — 25 甘露醇a — — + + 26 葡萄糖 + — + + 27 MR + + + + 28 VP + + + + 29 硝酸盐（产气） — — — — 30 山梨醇 — — — — 31 明胶 — — — — 32 棉子糖 — 33 核糖 — — — — 34 果糖 + + + + 35 松二糖 + + — + 36 甘露糖 — — + — 37 覃糖 + + + — 备注：“+”90%以上结果为阳性，“-”表示90%以上结果为阴性。 我们选取了生化反应有较明显差异，标准菌株之间结果一致，并且与文献报道相符合的结果，纳入最终的生化试验标准结果表格。 三、采用国际标准和国外先进标准情况及