食品中噻苯隆残留量的检测方法 液相色谱法.docVIP

前 言 本标准按照为GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位： 本标准主要起草人： 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 食品中噻苯隆残留量的检测方法 高效液相色谱法 本标准规定了猪肉、猪肝、脂肪、鸡蛋、牛奶、蜂蜜、苹果、大白菜、茶叶中噻苯隆残留量测定的高效液相色谱法。 本标准适用于猪肉、猪肝、脂肪、鸡蛋、牛奶、蜂蜜、苹果、大白菜、茶叶中噻苯隆残留量的测定。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法（GB/T 6682-2008, neq ISO 3639:1987） 方法提要 动物源性试样、茶叶用乙腈提取，植物源性试样用1%乙酸乙腈提取，离心后，经正己烷脱脂后，用C18固相萃取柱净化，过滤膜后用高效液相色谱仪测定，外标法定量。 试剂和材料 除非另有规定，均使用分析纯试剂，水为GB/T 6682规定的一级水。 乙腈：液相色谱级。 甲醇：液相色谱级。 乙酸乙酯：液相色谱级。 正己烷：液相色谱级。 冰乙酸。 氯化钠。 无水硫酸钠：用前在650 ℃灼烧4 h，贮于干燥器中，冷却后备用。 乙酸乙腈溶液（1+99，V/V）：取990 mL乙腈，加入10 mL冰乙酸，摇匀备用。 乙腈水溶液（30+70，V/V）：取300 mL乙腈，加入700 mL水，摇匀备用。 标准品：噻苯隆（Thidiazuron，C 51707-55-2）纯度大于或等于98%。 标准贮备液:称取适量标准品（精确至0.1 mg）于100 ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，配成100 μg/mL标准贮备液待用。实际使用时根据需要再用甲醇将标准溶液稀释成适用浓度的标准工作液。置于4 ℃冷藏，6个月使用。 固相萃取小柱：C18柱，0.5 g，6 mL，或相当者。 有机相滤膜：0.22 μm。 仪器与设备 高效液相色谱仪，配紫外检测器或二极管阵列检测器。 分析天平：感量 0.0001 g和 0.01 g。 离心机：转速不低于4000 r/min。 组织捣碎机。 均质器。 旋转蒸发仪。 固相萃取装置。 氮吹仪。 涡旋混匀器。 试样制备与保存 猪肉、猪肝 称取鸡肉、猪肉、猪肝等样品500 g，将其切碎后，用匀浆机将样品加工成浆状，混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的盛样袋内，密闭并标明标记，于-18 ℃以下冷冻保存。 苹果和大白菜 称取苹果、大白菜等水果或蔬菜样品500 g，去壳、去籽、去皮、去茎、去根、去冠（不可用水洗涤），将其可食用部分切碎后，用匀浆机将样品加工成浆状，混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的盛样袋内，密闭并标明标记，于-18 ℃以下冷冻保存。 蜂蜜 取有代表性样品约500 g。对于无结晶的样品将其搅拌均匀；对于有结晶析出的样品，在密闭情况下，将样品置于不超过60 ℃的水浴中温热，待样品全部融化后搅拌均匀，迅速冷却至室温。在融化时必须注意防止水分挥发。装入洁净容器作为试样，密封并标明标记。 茶叶 取代表性样品约100 g，用粉粹机粉碎，混匀，装入洁净的容器内，密封，标明标记，于0~4 ℃保存。 在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生待测物含量的变化。 测定步骤 提取 猪肉、猪肝、脂肪、牛奶、鸡蛋 从试样中称取2 g(精确到0.01 g)于50 mL塑料离心管中，加入乙腈20 ml，于暗处浸泡10 min，均质，以4000 r/min离心10 min，取上清液。分别再用10 mL、5 mL乙腈重复提取残渣两次，合并3次提取液于50 mL离心管中，再以4000 r/min 离心10 min，过滤，取上清液，加入2 g氯化钠振荡，静置分层，去除水层，在得到的上清液中加入适量的无水硫酸钠脱水后，将液体转移到分液漏斗中，加入10 mL正己烷，充分振摇1 min，静止分层，将下层乙腈层转移至清洁的塑料离心管中，在含有正己烷的分液漏斗中再加入10 mL乙腈，振摇1 min，静止分层，合并乙腈层，于45 ℃中用氮吹至近1 mL待用。 苹果、大白菜 从试样中称取2 g(精确到0.01 g)于50 mL塑料离心管中，加入1%乙酸乙腈20 mL 及2 g氯化钠，于暗处放置5 min后均质，超声波提取10 min，以4000 r/min的转速离心10 min，加入适量无水硫酸钠脱水后，取上层有机相于45 ℃中用氮吹至近干待净化。 蜂蜜 从试样中称取2 g(精确到0.01 g)于50 mL塑料离心管中，加入2.0 mL水，于涡旋混匀器上快速混合1 min，加入5 mL乙