出口食品中六溴环十二烷的测定 液相色谱-串联质谱法.docVIP

前 言 本标准依据GB/T 1.1-2009的起草规则编写。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出归口。 本标准起草单位：中华人民共和国湖北出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：出口食品中六溴环十二烷的测定方法 范围 本标准规定了食品中三种六溴环十二烷异构体（α-HBCD，β-HBCD和γ-HBCD）含量的液相色谱-质谱和同位素稀释液相色谱-质谱测定方法。 本标准适用于鱼、虾、蛋中α-HBCD，β-HBCD和γ-HBCD含量的测定。本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。 GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法试样中α-HBCD，β-HBCD和γ-HBCD经索氏提取，提取液经凝胶色谱净化，用液相色谱-质谱仪测定，外标法定量。 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682 规定的一级水。 正己烷：色谱纯。 二氯甲烷：色谱纯。 甲醇：色谱纯。 乙腈：色谱纯。 正己烷-二氯甲烷（1:1，V/V）：取200 mL正己烷，加入200 mL乙腈，混合均匀。 α-HBCD，β-HBCD和γ-HBCD标准品溶液：浓度均为100 μg/mL。 α-HBCD，β-HBCD和γ-HBCD标准溶液：吸取标准溶液（.6），用配制成浓度为1g/mL的标准溶液。 标准溶液：吸取标准溶液（.7），用配制成α-HBCD ng/mL、1.00 ng/mL、5.00 ng/mL、10.00 ng/mL0.00 ng/mL、100.00 ng/mL，β-HBCD、γ-HBCD浓度依次为0.25 ng/mL、0.50 ng/mL、.50 ng/mL、.00 ng/mL、25.00 ng/mL、50.00 ng/mL的混合系列标准溶液 无水硫酸钠：650℃灼烧，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。 1）。凝胶色谱柱：长40 cm，内径3.0 cm聚四氟乙烯活塞玻璃层析柱，柱底为砂心筛板。用正己烷-二氯甲烷溶液（4.5）浸泡的凝胶，以湿法装入柱中，柱床高约32 cm，凝胶始终保持在洗脱剂中。 微孔滤膜：0.2 μm，有机相型。 液相色谱-质谱仪：配有电喷雾离子源。 索氏提取装置。 氮吹仪 旋转蒸发器。 分析天平：感量0.1 g。 鱼和虾取其可食部分，切成小块，用粉碎机制成肉糜；蛋品去壳，制成匀浆密封并标。索氏提取：对于鱼和虾，称取试样20 g（准确至0.1 g），对于蛋，称取试样 g（准确至0.1 g）。将试样置于研磨器皿中，加入无水硫酸钠 g～10 g（视试样含量水而定），混匀，将试样与无水硫酸钠的混合物置于滤纸桶中，加50 mL二氯甲烷，索氏提取约6 h，将二氯甲烷提取液旋转蒸发浓缩至约mL，μm滤膜后供凝胶色谱柱净化使用。 凝胶色谱柱净化：将试样浓缩液经凝胶色谱柱以正己烷-二氯甲烷溶液洗脱，mL/min，弃0 mL～150 mL流分，收集10 mL～300 mL流分。将旋转蒸发浓缩至，μL甲醇混匀，过0.2 μm滤膜，滤液供LC-MS/MS测定。 ）　色谱柱：C18， 150 mm×2.1 mm（内径），5 μｍ，或相当者； b）　流动相见表１； c）　流速：250 μLmin； d）　进样量：10 μL表1 洗脱min 75%甲醇水溶液/% 乙腈/% 0 80 20 1.00 80 20 1.10 45 55 11.00 45 55 11.10 80 20 20.00 80 20 质谱条件 a）　离子源：电喷雾离子源； ）　扫描方式：负离子扫描； c) 检测方式：多监测；a））表α-HBCD，β-HBCD和γ-HBCD的参考保留时间分别约为7.12 min，7.59 min和8.52 min，标准溶液的选择性离子流图见附录B中图B.1。以各系列标准溶液的浓度与对应的峰面积绘制标准曲线，外标法定量。 定性测定 在相同实验条件下，样品中待测物质的保留时间，与标准溶液的保留时间偏差在±2.5%之内；每种化合物的质谱定性离子至少应包括一个母离子和两个子离子，且样品中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的混合标准工作溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表2规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。 表2 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 50% 20%至50% 10%至20% ≤10% 允许的最大偏差 ±20% ±25% ±30% ±50% 空白试验 除不加试样外，均按上述测定步骤进行。 结果计算和表述 用色谱数据处理或按式（１）计算试样中α-HBCD，β-HBCD和γ-HBCD含量。 ……………………………（1） 式中： X ——试样中α-HBCD，