出口药用植物中双胍辛胺残留量的测定 高效液相色谱法.docVIP

ICS67.050 X 04 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T XXXXX—XXXX 出口药用植物中双胍辛胺残留量的测定 液相色谱-质谱／质谱法 Determination of Iminoctadine residues in medicinal plants for export——LC - MS／MS method XXXX - XX - XX发布 XXXX - XX - XX实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写的规则》给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中华人民共和国国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国北京出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：王金花、张蓉等。出口药用植物中双胍辛胺残留量的测定液相色谱-质谱／质谱法 范围 本标准规定了出口药用植物中双胍辛胺残留量的液相色谱-质谱/质谱检测方法。 本标准适用于红花、连翘、川芎、当归和银杏叶等药用植物中双胍辛胺残留量的检测和确证。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB／T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(neq ISO 3696:1987) 方法原理 试样中残留双胍辛胺用甲醇超声提取，分散固相萃取净化，超高效液相色谱-质谱/质谱仪检测，外标法定量。 试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为色谱级，水为符合GB／Ｔ 6682规定的一级水。 盐酸胍：分析纯。 甲醇。 氢氧化钠：分析纯。 三氯甲烷。 甲酸：分析纯。 乙腈。 乙酸铵。 无水硫酸镁（MgSO4）：分析纯。 无水乙酸钠（Na2SO4）：分析纯。 硫酸：分析纯。 石墨化炭黑吸附剂（GCB）：粒径120 μm～400 μm。 十八烷基硅烷 (ODS) 键合相吸附剂（C18）：粒径40 μm ～60 μm。 0.5%甲酸：准确移取0.5mL甲酸（4.5）于100mL容量瓶中，加水定容。 双胍辛胺三乙酸盐标准品（Iminoctadine triacetate）：CAS号57520-17-9，分子式C24H53N7O6，分子量535.7，纯度大于等于99%。 双胍辛胺三乙酸盐标准储备溶液：准确称取适量的双胍辛胺三乙酸盐标准品（精确至0.01?mg），用甲醇溶解，配制成1000 μg／mL的标准储备溶液，-18℃下保存。 双胍辛胺三乙酸盐标准工作溶液：根据需要取适量双胍辛胺三乙酸盐标准储备溶液，用甲醇稀释成1 μg／mL标准工作溶液，-18℃下保存。 基质空白溶液：将不同基质的阴性样品分别按照“7.1 提取与净化”处理后得到的溶液。 基质标准工作液：根据实验需要吸取适量储备标准工作溶液（4.15），用基质空白溶液稀释成适当浓度的标准工作液，现用现配。 微孔滤膜：尼龙，13 mm（i.d.），0.2 μm。 仪器和设备 超高效液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 粉碎机。 组织捣碎机。 天平：感量分别为0.01 mg和0.01 g。 超声波振荡器。 旋涡混匀器。 离心机：转速不低于4 000 r／min。 离心管：具塞，聚四氟乙烯，50 mL。 试样制备与保存 取代表性样品500 g，用粉碎机粉碎。混匀，均分成两份作为试样，分装，密闭，于 0~4℃保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生农药残留含量的变化。 分析步骤 提取与净化 称取5 g（精确至0.01 g）试样于50 mL离心管（5.8）中，加1.5g 盐酸胍（4.1）混匀，加10?mL水，浸泡0.5 h。加入10?mL甲醇（4.2）摇匀，在40℃以下超声提取30 min，4000 r/min离心10min。取上清液10 mL，加1 mL 2M NaOH溶液，漩涡混匀，加10 mL三氯甲烷剧烈振摇混匀，静置分层，将上层水相转移到另一个离心管中，加10 mL三氯甲烷入水相重复提取一次，合并两次的下层有机相，40℃以下旋转蒸发至近干，0.5%甲酸溶液溶解、定容至1 mL，加入10 mg石墨化炭黑吸附剂（4.11），50mg ODS（4.12），剧烈振摇 1min，4000 r/min离心10min，取上清液用0.2 μm（4.19）滤膜过滤后，用液相色谱-质谱／质谱仪测定。 液相色谱-质谱／质谱仪测定 液相色谱参考条件 a) 液相色谱柱： HILIC, 100 mm×2.1 mm（i.d.），粒度1.7?μm，或性能相当者。 b) 柱温：35℃。 c) 流动相：0.