大鼠大脑皮层星形胶质细胞体外培养方法建立及鉴定.pdfVIP

第 1卷第 6期 神经药理学报 V_0l_1NO．6 2011年 12月 ActaNeuropharmacologica Dpec．20l1 大鼠大脑皮层星形胶质细胞体外培养 方法建立及鉴定 范 悦 颜 勇 商亚珍 河北省中药研究与开发重点实验室，承德医学院中药研究所，承德 ，067000，中国 【摘要 】 目的：纯化和鉴定体外培养的大鼠大脑皮层星形胶质细胞。方法：取 1～3天新生大鼠大脑皮层细胞 进行体外培养，通过差速贴壁和传代去除成纤维细胞和神经元等 ，采用免疫组化法检测星形胶质细胞特异性蛋 白一胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein，GFAP)鉴定星形胶质细胞 。结果 ：培养 的细胞具有典型的 星形胶质细胞形态且生长旺盛 ，第 3代 95％ 以上为星形胶质细胞 ，特异性抗原 GFAP表达 阳性 。结论 ：该方法 操作简单，可靠，是一种有效的新生大 鼠大脑皮层星形胶质细胞体外培养方法。 【关键词 】星形胶质细胞；体外培养；免疫组织化学；胶质纤维酸性蛋 白 【中图分类号 】R965．2 【文献标识码 】A 文章编号：2095—1396(2011)06—0022—006 A M ethodofSeparatingandCulturingAstroeytesfrom RatCerebral Cortex FAN Cue，YAN Yong，SHANGYa—zhen HebeiProvincialKeyLaboratoryofTraditionalChineseM edicineResearchandDevelopment．，Instituteof TraditionalChineseM edicine，ChengdeM edicalCollege，Chengde，067000，China 【ABSTRACT】Objective：Toestablishamethodforratcerebralcorticalastrocyteculture， purificationandidentification．Methods：Thecerebralcortexcellsofnewbornrats(1-3days old)wereculturedinvitro．Thefibroblastcellsandneuronswereremovedthroughdifferential adhesionandpassage．Glialfibrillaryacidicprotein(GFAP)，anastrocytespecificprotein，was usedofridentifyingastrocytesby immunohistochemicalmethod．Results：Thecutluredcells showedtypicalmorpho1ogicalfeaturesofastrocytesandgrew wel1．Thethirdgenerationofthe cellscomprised 95％ astrocytes．Conclusions：Themethodisasimpleandreliableinvitro cutlure ofrobtaininghighpurityastrocytesfrom newbornratcerebralcortex． 【KEYWORDS】astrocytes；invitro；immunohistochemical；glialfibrillaryacidicprotein 神经胶质细胞是神经组织 中除神经元以外的另一 存在复杂的联系与作用 ，以此维持神经系统 内环境的稳 大类细胞 ，广泛分布于中枢神经和周