生物芯片及其的应用进展.pdfVIP

3·74 · 肿瘤防治研究 2004 年第 31 卷第 6 期 生物芯片及其应用进展 杜金伟综述 , 朱 　平审校 关键词 :生物芯片 ;微阵列 ;进展 ( ) 中图分类号 :R394 　　文献标识码 :A 　　文章编号 2004 0 　引言 DNA 或 RNA 序列有更强的亲和性及特异性 ,杂交 生物芯片是世纪之交发展起来的一项分子生物 后更加稳定 ,并且 PNA 探针比DNA 探针更容易接 学新技术 。它是将生物分子有序地固化于支持物 近靶序列 。Henrik Stender 等[2 ] 采用荧光原位杂交 ( ) 如硅片 、玻片 、聚丙烯酰胺凝胶 、塑料 、尼龙膜等 的 ( FISH) 法 ,通过 PNA 探针检测 、计数大肠杆菌 ,与 表面 ,形成高密度的点阵 , 与样品中的靶分子作用 传统的方法相比,不但提高了灵敏度 ,而且更加快速 后 ,对杂交或反应信号进行检测 ,从而对样品中的靶 便捷 。值得特别提出的是 ,最近国内东南大学[3 ] 研 分子进行定性或/ 和定量 。该技术不仅可以显著提 制出了双链 DNA 探针芯片 :把 3 ’端具有反向互补 高实验室的工作效率 ,更重要的是 ,它可以同时对一 序列的单链寡核苷酸点到玻片上 , “退火”使反向互 个生物体的多个基因甚至全部基因进行分析检测 , 补序列形成“发卡”结构 ,充当引物 ,最后经 Klenow 研究生物分子之间的相互作用 。 酶延伸形成完整的双链 。该种芯片为序列特异性 DNA蛋白质相互作用的研究提供了一种新的技术 1 　生物芯片的种类 平台。 根据 目前生物芯片的特点和发展趋势 ,可以将 蛋白质芯片比基因芯片难于制作 ,且定位于载 其分为四类 ,即基因芯片 、蛋白质芯片 、组织芯片和 体表面的蛋白质分子易于改变空间构象而失去原有 PCR 芯片 。把寡核苷酸 、DNA 或cDNA 固定在芯片 的生物活性 。故而 , 目前研究热点集中在如何在保 ( ) 载体上 ,这样的芯片被称为基因芯片 GeneChip 。 持蛋白质功能的前提下 ,将其固化于载体表面 。R. 蛋白质芯片上固定的探针分子为多肽或蛋白,包括 Bashir 小组[4 ]在硅片表面热氧化形成 SiO2 层 ,通过 抗原 、抗体 、受体 、酶等 。组织芯片采用了与基因芯 ( ) 射频溅射 radiofrequency sputtering 覆盖铂于 SiO2 片 、蛋白质芯片完全不同的设计策略 ,它是针对在原 ( ) 层上 ,然后把硅片置于抗生物素蛋 白 Avidin 反应 位检测不同样本中同一个实验指标而设计 。将几十 液 ,缓冲液冲洗后 ,用生物素与芯片上的 Avidin 反 到几百个小组织样本以规则的阵列方式包埋于同一 应 ,证明Avidin 仍保持生物活性 。凝胶也是一种较 蜡块后 ,进行切片制作而成 。用生物芯片进行 PCR