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家禽生产与禽病防治专题蟋》 561
T040027
副鸡禽杆菌基因指纹图谱分型初探术
吕学泽1’2王雪敏1梁玉荣1’2张培君2龚玉梅2王宏俊2
(1.河北工程大学农学院,河北邯郸056001;2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京100097)
引言/目的
随着分子生物学的快速发展,各种基因分型方法也随之建立,然而在微生物研究中,基于DNA的
鉴别和分类方法被认为是更可靠、简洁、廉价的方法【l】。国;bSorianoVE等【2J用ERIC.PCR技术对副鸡禽
杆菌进行了分型研究,证实了不同来源的C.2型菌株具有相同的ERIC谱型,同时把墨西哥流行的菌株划
分为17类。因此,有必要研究副鸡禽杆菌的指纹图谱进行进一步研究。鉴于国内B株流行情况增多,菌
株毒力、抗原差异较大【3】,我们在分析国际标准株的同时,还对国内分离的B型菌株来进行指纹图谱的
亚型分析。
材料方法
行遗传距离计算和聚类分析。
结果
/21)。结果显示多态性良好,单独用鼬蛆D引物便可区分不同血清型的菌株,从而可将其分为11个不
同谱型。10株国际标准株,疫苗株以及4个国内分离株的副鸡禽杆菌电泳图谱经crosschecker软件分析
遗传距离为0.0476。0.5767之间,根据遗传距离可将所有副鸡禽杆菌分为4个聚类群。
讨论
目前的研究大都是以多个RAPD引物或者E耐C引物单独的进行指纹图谱分析,从理论而言,RAPD
和ERIC作为不同的指纹标记是可以组合应用的,这样既利用了RAPD标记多态性丰富的优点,同时又结
合了ERIC标记的特异性。
近年来副鸡禽杆菌新分离株大量出现,为该病原的分型鉴定带来了困难。鉴于国内外尚未报道有副
鸡禽杆菌基因分型的研究,我们利用指纹图谱分析对其进行基因分型,既可对该病原菌血清学分型进行
完善和补充,又可为鸡传染性鼻炎分子流行病学调查提供有效的手段。
参考文献
LG, BrennerDJ,ColwellRR, GrimontPAD,Kandler MI,Moore RGE,
[1]Wayne P,KrichevskyLH,Murray
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TrtiperHG(1987)hat.J.Syst.Bacteri01.37:463-464.
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[2]Soriano a1.TypingHaemophilusparagallinarumbyusing repetitiveintergenic
consellSUS-basedchainreaction.AvianDis.2004Dee;48(4):890-5.
polymerase
【3】卢冷轶,苗得园,赵德明等.副鸡嗜血杆菌B型分离株免疫原性的比较和疫苗株的筛选【J】.中国兽医科技,2005,35
(9):703—706
·基金项目:“十二五计划”课题:2011AAl0A210,北京市自然科学基金项目(6102009)。该文已被‘中国兽医科学》录用。
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