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32种中药水提取物的体外抗菌活性研究 曾富强 王斌 李旭廷李金 良 詹素琼 袁定胜 梁歌 四川省畜牧科学研究院 四川，成都 610066 提取32味中草药水煎液，采用微量肉汤稀释法测定对标准大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的体外抑 菌活性，筛选出对金黄色葡萄球菌具有较好体外抑菌活性的中草药11味，并对三株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)进行了最低抑菌浓度(MIC)的测定。结果显示：有24味中草药水煎液具有体外抑菌活性，且对金黄色葡萄 球菌的抑菌效力大于大肠杆菌，以黄连和黄柏对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好；三株MRSA对筛选的11味中草 药中的10味均产生了不同程度的耐药，MIC增加2～4倍，仅香薷对MRSA的MIC减少2～4倍。 中草药；抑菌；最低抑菌浓度；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 四川省畜牧兽医学会2012年学术年会 Lindl．)、白芷(Angelicadahurica)、知母(Anemarrhenaasphodeloides annua jasminoidesE11is)、青蒿(ArtemisiaL．)、射干(Belamcanda 片购自成都德仁堂药店。 1．2菌株 菌CVCC2801购自中国兽医药品监察所。 1．3培养基 删琼脂和删肉汤培养基(杭州天和微生物试剂有限公司)。 1．4主要仪器 恒温培养箱，旋转蒸发仪、微量移液器等。 1．5其它材料 96孔板。 2方法 2．1 中药提取物的制备 采用传统水煎法，蒸馏水预先浸泡lh，加热煎煮2次，第一次保持微沸30min，滤出药液：药渣加温水再煮 沸，仍保持微沸30min，滤出药液。合并2次滤液，旋转蒸发仪浓缩至生药含量为ig／ml。 2．2细菌悬液的制备 108 h。挑取35个菌落于装有生理盐水的试管，调整浑浊度至0．5麦氏比浊度(1～2XCFU／ⅢL)备用。 的大肠杆菌和金葡标准菌悬液再稀释i00倍，并分别加入加了药液的96孔板，每孔lOOul。每排的药液最终浓 ml、lmg／ml、0．5mg／al，Omg／ml。菌液加好后置无菌盒，37℃恒温箱培养24h。 2．4结果判定 在黑色背景的光源下与对照组孔(包括青霉素对照、肉汤对照)比较，检测菌的生长情况，96孔板内肉 汤呈混浊生长，孔底出现沉淀等判断为有菌生长，反之，澄清为无菌生长，无细菌生长孔所含最低抗菌药物 浓度即为MIC(最低抑菌浓度)。筛选出具有较好抑菌活性的11种中草药提取物，用微量肉汤稀释法测定对3 株MRSA的MIC，以标准金黄色葡萄球菌作对照。 3 结 果 3．1种中草药提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌标准菌株的体外抑茵作用 结果见表l，32味中草药提取物中对大肠杆菌标准菌株有抑菌作用的有19味，对金黄色葡萄球菌标准菌 420 第三篇疾病防治 中药提取物有大力子、黄柏、黄连、香薷、黄芩、千里光、薄荷、知母、栀子、青蒿、射干共11味。MIC 子共3味，MIC均为62．5mg／ml。 表1 32种中草药提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌标准株的MIc值测定 注：MIC500mg／ml以“＼”表示 3．2 11种中草药提取物对3株MRSA的体外抑菌作用 定，结果见表2。与标准金黄色葡萄球菌对照相比，除香薷外，3株MRSA对其余10味中草药提取物表现出不同 程度的耐药，其中对栀子、大力子和薄荷完全耐药。仅黄连、射干、黄芩、黄柏、香薷五味中药对三株 421 四川省畜牧兽医学会2012年学术年会 注：MIC大于500mg／ml以“＼”表示 4讨论 4．1 本试验选取的32味中草药粗体物中有24味表现出不同程度的体外抑菌效果，从表1统计结果得出，24 味中药中对金黄色葡萄球菌的抑菌效果普遍优于对大肠杆菌的抑菌效果，其中以黄连和黄柏对金黄色葡萄 本试验中黄芩对金黄色葡萄球菌的抑菌效果与田应彪的研究有一定差异，这可能是由于药物的产地、提取 工艺等不同造成。金黄色葡萄球菌与大肠杆菌由于细胞膜结构的差异，对不同种类的抗生素