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第五届全国催化剂制各科学与技术研讨会
C．其他催化新材料的制备与表征
薛屏啪卢冠忠t+郭杨龙3王筠松8吴东方8
7-ADCA的高效、安全简便的生产，极大地推进了半合成伊内酰胺抗生素产业的发展。可
是，随着基因工程的发展，重组青霉素酰化酶已能高效表达、大量生产，而新的酶固定化载
体，适应于工业化生产的方法和技术已亟待改进…。MCM-41介孔分子筛具有较大的孔径、
高的比表面积及较小的扩散阻力，因而极有希望成为酶等生物大分子的宿主。本文合成了
青霉素酰化酶的活性和稳定性。
1．实验部分
I．1．载体合成
六烷基三甲基溴化铵fCTAB)为模板剂，合成母液的摩尔配比为：
硅MCM．4I合成同上。
1．2．表征方法
kV,管
ASAP
电流25mA。样品的孔径结构及比表面积在MICROMERITCS2010吸附仪上测定。
升温至450℃。
1．3．酶的固定化
直接法：取01
浴摇床进行固定化，固定化的时间为12h。共价结合法：取o．5gFe-MCM一41，加入10mL
mol／L oC
10％的Y．氨丙基三乙氧基硅烷的水溶液，用O．01 HCI调节pH值至5．0后，在65
下反应3h。固体用去离子水洗涤后在l100C下真空干燥。将处理过的载体浸入2．5％戊二醛
水溶液中，在室温下反应1
可与酶蛋白的氨基发生化学反应，使酶分子以共价键结合方式固定于载体表面，其固定化过
程与未经修饰的载体相同。
作者简介薛屏，女，41岁，教授，主要从事介孔分于筛催化研究。’联系人．电活：021 educn
C其他催化新材料的制各与表征
1．4．固定化酶的活性与间歇操作稳定性测定
0．1mol／L
固定化PA的活性测定采用碱滴定法：将固定化酶与8mL去离子水和2mLpH
mL
78的磷酸盐缓冲溶液混合摇匀后，放入37(3恒温水浴槽中恒温，另取lO40／4wt)的青
8
霉素G钾盐溶液同样恒温。5rain后将两溶液混合，用标准NaOH溶液滴定，保持pH：7
水解反应后，用离子水洗涤、抽滤后，再次置入间歇釜进行反应，以考察其操作稳定性。
2．结果与讨论
2．1．介孔载体的结构与表面性质
由图1可知，Fe—MCM．41的XRD图谱在小角区出现4个衍射峰，各衍射峰的位置和
强度与六方晶系MCM-41相应的衍射峰相一致，说明合成的Fe．MCM．41具有很好的六方长
半径(o．064
nm)期T-Si4-(o．041nm)，铁同晶取代骨架硅原子后引起六方晶胞参数和d值增大
的结果。
]《一l鲁ogj。g∞1。o
图I载体的XRD图谱 图2载体的NHl．TPD曲线
1 XRD ofthe 2 NH ofthe
Figure patternssupports Figure 3·TPDprofiles suppons
的NH，脱附峰的强度(峰面积)明显增大，而NH3脱附的温度变化不大，脱附曲线极大值
心数目有明显增加，而酸强度变化不大
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