纯化兔血清PON1在大鼠体内药动学初步研究.pdfVIP

中华医学会急诊医学分会第十三次全国复苏与中毒学术论文交流会论文汇编 纯化的兔血清PONl在大鼠体内药动学初步研究 王娜娜代恒袁丽赵敏 中国医科大学附属盛京医院急诊科沈阳 110004 它是一种能水解有机磷农药对氧磷(paraoxon)的A一酯酶，可与有机磷可逆结合，水解有机磷，从 而避免有机磷对中枢神经系统的损伤，所以被认为在有机磷类化合物解毒中有重要意义。研究显示 保护作用。关于外源性兔血清PONl的体内过程有过研究，但其药动学研究国内外未见有报道。本 实验通过静脉给予大鼠纯化的兔血清PONl，检测不同时间大鼠体内PONl活性，从而初步探讨纯 化的兔血清PONl的药物动力学，为进一步研究PONl作为有机磷催化清除剂提供依据。 1材料和方法 1．1试药与试剂 乙酸苯酯(分析纯)，购自美国Sigma公司。Tris、氯化钙、氯化钠、盐酸等均为国产试剂。 限公司。实验期间自由进食水。 1．3实验设计及分组 试验分三个剂量组。每剂量组66只大鼠，雌雄各半，随机分成11组，每组6只。将每只大鼠 给药后不同时间点PONl活性均值与给药前血清PONl活性均值进行比较，将差值作为大鼠体内外 源性纯化的兔血清PONl活性值。 冰箱保存待检。 Blue 1．4纯化兔血清PONl方法首先行以Cibacron3GA琼脂糖为介质的亲和层析，之后以 CL-6B为介质进行两次阴离子交换层析，最后再行一步亲和层析。收集蛋白后离心 DEAE-sepharose 超滤，使蛋白浓缩至lJ3000U，ml。 1．5血清PONl活性检测方法用UVl601分光光度计连续测定。 1．6数据分析 每组大鼠药物浓度数据用3P97药代动力学软件进行拟合处理，根据F检验和AIC值选择适 当的房室模型，计算药代动力学参数。对于相同的权，当F检验有显著意义(Po．05)时，取AIC 值较小的房室数，当F检验无显著意义(P0．05)时，则取房室数少者。根据拟合优度值选择权重 系数。部分数据用Excell3．0、SPSSl3．0软件进行统计分析。 2结果 三个剂量组大鼠体内PONl时间一活性差值数据见图1。经过3p97药动学软件拟合，大鼠体内 PONl三个剂量组均为线性过程，均符合二室模型。加权因子选择I／C／C。药动学参数值见表1。三 个剂量下雌雄大鼠的差值活性无显著性差异(p0．05)。 ·261· 中华医学会急诊医学分会第十三次全国复苏与中毒学术论文交流会论文汇编 3讨论 雌雄鼠体内基本动力学行为相同。中央室表观分布容积提示PONl可能之分布于全身血液中，很少 分布到其他组织或在某组织内聚集，这需要进一步组织分布的试验进行证实。 目前研究表明PONl对有机磷解毒的预处理和治疗有重要意义，被认为是最有发展前景的有机 磷催化清除剂。作为催化清除剂要求其体内半衰期(或平均保留时间)长，其清除过程相对于OP 转移动力学和与清除剂反应速率足够长。通过本实验PONl的消除半衰期约为20h，而有机磷必须 在几分钟内被从血液中清除，故可认为在清除有机磷过程中酶量相对恒定。 重组PONl目前已经被广泛研究，但关于它的药动学资料目前仍未有记载。天然酶与重组酶的 组酶更接近于天然酶。所以本实验研究的纯化兔血清PONl为重组PONl的研究奠定基础。 本实验只对PONl的体内药物动力学进行了初步研究，其组织分布、代谢等方面的规律需要在 以后的工作中进行进一步研究。 急诊观察室留观病人滞留原因分析及管理对策 向莉陈冬娥 华中科技大学同济医学院附属协和医院急诊科430022 急诊观察室是急诊科的重要组成部分，在急诊病人的诊疗和观察过程中起着不容忽视的作用。 留观对象主要包括暂时不能确诊、病情危重的病人，或经抢救处置后需要待床进一步住院治疗的病 人。观察室病人原则上在3．5天内离院、转院或收留住院[1]。而在我们的现实护理工作中发现， 留观病人滞留时间远远大于3-5天。急诊科毕竟是抢救急、危、重症病人的重要场所，也是医院