4-1BBL基因转染Raji细胞增强利妥昔单抗活性的研究.pdfVIP

· 494 · 2014年 6月第 19卷第 6期 ChineseClinicalOncolo~v，Jun．2014．Vo1．19．No．6 4—1BBL基 因转染 Raji细胞增强利妥昔单抗活性的研究 264003 山东烟台 滨州医学院药理学教研室药物研究所 姜文国，张树平 ，许 勇，栾海云 摘【 要】 目的 探讨4-1BBL基因转染对Raji细胞功能及利妥昔单抗活性的影响。方法 采用脂质体法将4-1BBL 基因转染Raji细胞 ，实验分为转染组 (4-1BBL组)、转染空质粒组 (Mock组)及未转染组 (对照组)。Westernblotting鉴定转染 48h后各组4—1BBL蛋白水平 ，采用CCK一8法检测不同浓度 (20．0、10．0、5．0、2．5、1．25、0．625mg／m1)利妥昔单抗处理48h后 Raji细胞的增殖率 ，分别采用CCK一8及ELISA法检测与不同效／靶 比(5：1和 10：1)活化外周血淋巴细胞共培养48h各组淋巴 细胞增殖率及培养上清液的白介素(IL)一2浓度。结果 4-1BBL组中4-1BBL蛋白水平均高于对照组和Mock组(P0．05)，4． 1BBL组 Raji细胞增殖率随利妥昔单抗浓度升高而降低 ，且当浓度2．5rag／ml，增殖率均低于对照组和Mock组 ，差异有统计学 意义(P0．05)。在5：1和 10：1N种效／靶比下，4-1BBL组淋巴细胞的增殖率及上清液 IL一2水平均高于对照组和 Mock组 ，差 异有统计学意义(P0．05)。对照组和Mock组中上述指标的差异均无统计学意义(PO．05)。结论 4—1BBL基因转染Raji 细胞可增强利妥昔单抗活性 ，提示细胞免疫治疗结合抗体靶向治疗将成为肿瘤免疫治疗的重要策略。 【关键词】 4—1BBL；Raji细胞；利妥昔单抗； 免疫治疗 中图分类号：R733 文献标识码：A 文章编号：1009-0460(2014)06-0494-40 EnhancedactivityofrituximabonRajicellsvia4-1BBLgenetransfection JIANGWenguo，ZHANGShuping，XU ，LUANHaiyun．DepartmentofPharmacologyInstituteofMateria Medica，BinzhouMedicalUniversity，Yantai264003，China Correspondingauthor：ZHANGShuping，E—mail：zsp861122@126．com 【Abstract】 Objective ToexploretheinfluenceonfunctionandactivityoffituximabofRajicellsvia4-1BBLgenetransfec— tion．Methods Stableexpressionof4-1BBLinRajicellswascarriedoutthroughtransfectionmediatedbyliposome．Theexperiments contained4-1BBLgroup，Mockrgoupandcontrolgroup．The4-1BBLexpressionwasidentifiedbyWestern blottinganalysisat48hafter transfection．CCK-8methodwasusedtodetecttheproliferationat48haftertreatmentwithdifferentconcentrations(20．0，10．0，5．0， 2．5，1．25，0．625m#m1)ofrituximab．TheproliferationratesoflymphocyteandsupernatantIL一2levelsat48hafterco-cuhurewith theactivatedperipheralbloodlymphocytesundertheeffector／targetratioof5：1and10：1byCCK_8andenzyme—linkedimmunosorbent assay．Results Theproteinlevelof4—1BBLin4-1BBLgroupwashigherthanthose