惰性气体对乳鼠缺血缺氧模型脑保护作用的对比的研究.pdfVIP

2011年中华医学会全国麻醉学术年会论文汇编 惰性气体对乳鼠缺血缺氧模型 脑保护作用的对比研究 庄蕾1’2马大青2于布为1 1．上海交通大学医学院附属瑞金医院麻醉科，上海，200025 9NH 2．英国伦敦帝国理工大学麻醉、重症监护与疼痛系，伦敦，SWl0 在关于惰性气体的神经保护作用的研究中，大量研究已证实氙气无论是在体内还是体外都具有对脑损 伤模型的保护作用。氩气作为惰性气体家族的另一名成员，也在前期体外研究中被证实具有神经保护作用， 而氦气的作用仍存在争议。本研究拟通过乳鼠缺血缺氧脑损伤模型对比评价氩气、氦气和氙气三种惰性气 体的神经保护功能，并对其相关机制进行探讨。 1．材料与方法 1．1缺血缺氧动物模型的制作 后，将乳鼠置于37℃水浴中的气体暴露罐内，给予8％氧气+92％氮气的缺氧条件下处理90分钟。 1．1惰性气体处理及动物分组 气组(n_20)。未进行任何处理的一组乳鼠作为(5)阴性对照组(n_20)。 1．1组织学检测 包埋并行5um石蜡切片。将切片脱蜡脱水处理后，进行0．5％的甲酚紫染色。． 1．1细胞计数及图像分析 产后14天的动物大脑切片于光镜40X镜下对左右海马CAI区存活健康细胞数计数。产后49天的动 v1．13，美国)对两侧大脑 物切片取Bregma．3．6mm部位的切片，进行显微镜下摄片。采用软件(ImageJ 面积进行测量，并对各组右侧(手术侧)面积与左侧面积的比值进行比较。 1．1行为学检测 1．1．1平衡疲劳转动棒实验 动物造模后饲养至38天，进行平衡疲劳转动棒实验。设置转动棒的转速为30转／分钟，记录每只大鼠 停留在转动棒上的时间。每只大鼠共测试3次，每次之间间隔10分钟。次日设置转速为50转／分钟，再次 进行平衡疲劳转动棒实验。 1．1．1恐惧条件反射实验 动物造模后饲养至38天，进行恐惧条件反射实验，实验第一天，为训练日。给予20秒的声音刺激(CS)， 二天，为环境测试。将大鼠放入盒内，期间既没有声音刺激也没有电击，在8分钟的测试中观察记录每只 596 2011年中华医学会全国麻醉学术年会论文汇编 大鼠静止呆滞的时间。实验第三天，为声音刺激测试。在彻底改变测试环境后，发出20秒的声音刺激(CS)， 如此重复3次，最后一次声音刺激后平静4分钟将动物放回笼内，全程观察记录大鼠静止呆滞的情况。 1．1蛋白电泳检测 抗体或l：1000的Bcl．xL抗体一抗孵育，曝光图像保存。 I．结果 1．1海马存活健康细胞数各组间的差异 阳性对照组的动物右侧(手术侧)海马细胞的厚度较阴性对照组及各组惰性气体暴露组明显变薄。氩 气、氦气和氙气的右侧海马CAl区健康细胞数分别为544-6，48 4-4和474-5，均较阳性对照组右侧海马 (37 1．17周龄大鼠大脑组织缺失程度各组问比较 4- 氩气、氦气及氙气的右侧大脑残存面积与左侧大脑面积的比值(R／Lratio)分别为O．974-0．04、O．97 0．05及0．99 4-0．01，均明显高于阳性对照组的R／L ratio伊0．01)。 2．3神经行为功能的各组间比较 平衡疲劳转动棒转速为30转／分钟时，五组大鼠潜伏期之间无差异。增加难度至50转／分钟时，阳性 对照组的潜伏期从30转／分钟时的252-34-91．2秒缩短至111．0 4-51．7秒，并较其他四组时间明显缩短。 恐惧条件反射实验的环境测试中，阳性对照