辽宁省禽大肠杆菌血清型分布和大肠杆菌病防治研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集 辽宁省禽大肠杆菌血清型分布与大肠杆菌病防治研究 李玉文1，李惠兰1，张鹏1，李凤元1，李作义2，杨本勇1，李胜杰1，闰明媚1，昊洪涛1 (1．辽宁省动物防疫站，沈阳市东陵区东陵路58号，110161， E—mail：1h1040609@163．com。2．辽宁省动物卫生监督管理局) [摘要]本文以病原菌分离、血清型鉴定及本动物致病性试验对流行于辽宁省致病性禽大肠埃希氏菌的血清型分布、 绝对优势血清型。随机取优势血清型的不同地区分离株49个，以每个分离株108菌落形成单位(CFU)的细菌气管内接种1日 龄无特定病原体(SPF)鸡6羽，根据接种后7天内死亡和病变的情况，确定高致病性株为75．5％、中度致病株为18．4％、低致 病株为6．1％。研究表明，o-。。型菌对鸡的致病性强于0。、oz、0，s居第一位。对禽o。。，血清型的分离鉴定和致病性研究在国内 同类研究中尚属首次。用2001年分离的优势菌株的11个血清型大肠杆菌蜂胶苗和大肠杆菌新城疫二联蜂胶苗，对鸡免疫，从 染试验，100％健康存活。大肠杆菌蜂胶苗在污染场田间应用于肉仔鸡、蛋鸡其成活率均达92％以上，肉鸡只增重达0．8--1．0 市斤，蛋鸡提高产蛋率3％以上。为禽大肠杆菌病防治探索了一条有效途径。 [关键词] 大肠杆菌；血清型}防治 大肠埃希氏菌是侵害家禽的常见病原菌之一。 1999年高崧等报道了国内部分地区禽致病性大肠2方法 杆菌常见血清型为O。e、O，s、O。、o。e、O。和O。。型。为2．1大肠杆菌分离：无菌取病死禽肝、脾、心、大脑和 摸清我省禽大肠杆菌血清型分布，有效开展防治工 孵化后期死胚卵黄囊内容物，分别接种于营养肉汤、 作，2001—2005年，我们对全省的病死禽和死胚进 5％绵羊鲜血平板进行需氧和厌氧培养，37℃培养 行了大肠杆菌分离、血清型鉴定及该病的防治工作， 24h，取肉汤培养液划线接种于麦康凯琼脂平板， 现报告如下： 37℃培养24h，然后挑取麦康凯琼脂平板上粉红色 单个菌落，划线接种于EMB琼脂平板，37℃培养 1材料 24h，再挑取EMB琼脂平板上紫黑色带金属光泽的 1．1病料来源：辽宁省14个市病死禽、孵化后期死单个菌落，接种于普通肉汤，37℃培养18—24h备 胚。采集样品3215份。 用。以牛乳纯培养物放置一20℃冰箱保存备用。 1．2培养基和血清：麦康凯，营养肉汤、伊红美兰 2．2生化试验：取麦康凯琼脂平板上粉红色单个菌 (EMB)琼脂等培养基均购自北京奥博星生物技术落接种于普通肉汤，于37℃培养18h，按常规方法进 责任有限公司(批号分别20040202，行糖类发酵试验及生化反应，并观察结果。 。糖发酵管购自杭州天和微生物试剂有限2．3抗原的制备与血清型鉴定：按照中监所操作说 公司(批。牛乳培养基常规方法制备。明书方法制备。凝集抗原。将全部分离材料用平板 大肠杆菌标准抗O血清购自中国兽医药品监察所。 凝集试验方法筛选O血清型，然后用试管凝集试验 1．3试验动物：致病试验鸡，1日龄SPF雏鸡300进一步确定其O血清型。判定标准执行中监所操作 羽，购自辽宁益康生物制品厂。免疫攻毒鸡500羽购 说明书标准。 自某鸡场1日龄雏鸡。 2．4致病性试验：300只鸡分成50组，每组6只。将 1．4致病试验与攻毒试验菌株：2005年分离的优势o，。、O。、O：、O。。、O。伽Ol。。共49株试验菌株，均在 菌株，其血清型为07B、0109、0112、Ol、02、093型。 1．5疫苗：大肠杆菌蜂胶苗和大肠杆菌新城疫二联 mL)进行气管内注射／只。对照组注射0．1mL肉汤／ 蜂胶苗，省站与山东滨州华宏公司共同研制。ND油 只。致病性菌株的判定标准：(a)高致病株；50％以上 乳剂灭活苗，黑一厂生产。 的接种鸡死亡或产生严重病变(心包炎、肝周炎、气