新颖生物除草剂70014开发研究.pdfVIP

第七届全国新农药创制学术交流会论文集 新颖生物除草剂70014的开发研究 顾学斌’叶高艺2张育雷1倪玮锌1陶黎明1’2 (1．上海市农药研究所，上海，200032；2．上海南方农药研究中心，上海．201702) 摘要：在农用抗生素的筛选过程中，研究人员发现由浅灰色链霉菌SPRI-70014所产生的代谢产物对 大部分阔叶杂草的生长抑制作用显著，同时对几种单子叶杂草牛筋草，千金子、香附子防除效果也较好， 更重要的是发现其对花生和小麦植株具有有很好的安全性．同时经对有效成份的精制．鉴定。发现其主要 及谱图，确定该化合物平面结构和日本于1998年发现的骨吸收抑制剂A-75943化合物一致．经文献中心 查新得知：尚无有把该化合物作为农用抗生素使用的报道． 关键词：70014；农用抗生素：除草剂 1前言 自从本世纪40年代化学除草剂开始应用至今，化学除草荆就成为减轻劳动强度和提高工作效率的农 田除草的重要手段，目前化学除草剂占据绝大部分市场，但随着化学除草剂的不断应用，部分药剂明显暴 露其弊端，造成耐药杂草种群的上升、抗除草剂杂草的出现和对环境污染日趋严重，使得开发新除草剂的 难度和经费投入日益加大。故寻求更安全有效的除草制剂或方法成为除草剂发展的方向．近年来利用微生 物技术防治杂草等有害生物的成就使广大植保工作者及产业界都意识到将其作为生物防治的材料，具有巨 大的潜力，已受到世界各国的高度重视，纷纷致力于该领域的开发与研究． 上海市农药研究所研究人员从多种土壤中分离出微生物来制取微生物代谢产物，然后对这些代谢产物 分别进行精制、鉴定和开发应用。在此过程中，发现由浅灰色链霉菌SPRI-70014所产生的代谢产物对小 藜、稗草、马唐等多种农田杂草有良好的防除效果。经对有效成份的精制、鉴定．发现其主要活性物质为 定该化合物平面结构和日本于1998年发现的A-75943化合物一致。 本文简短介绍SPRI-70014的发酵研究、分离提取与鉴别研究、生物活性及安全性． 2发酵研究 我们对摇瓶接种量，发酵温度，发酵周期，摇瓶装量等一些影响发酵的因素作了一些试验，初步确定 定采用高压液相测定法，通过一系列试验得知接种量在5％～15％之间时，发酵单位差异不大，摇瓶装量对 发酵单位也无显著影响，倒是发酵温度对SPRI-70014抗生素产生菌的发酵有明显的影响，一般发酵温度 在28C时，发酵单位最高．另外对培养基配比也作了摸索，我们发现：氮源中酵母粉，玉米浆对发酵影响很 大；黄豆饼粉，牛肉膏次之；其余影响不是很大．随着酵母粉，玉米浆浓度的升高．发酵单位显著增加：适 量的黄豆饼粉对提高发酵单位有益．同时也发现葡萄糖对发酵影响很大，随着葡萄糖浓度的增加，发酵单 位增加． 我们根据试验的结果，设计出一个配方如下： 葡萄糖4．0％，黄豆饼粉3．O％，酵母粉0．5％，硫酸胺0．1％，氯化钠0．1％．磷酸氢二钠0．005％ 第七届全国新农药创制学术交流会论文集 明改良配方比Cl【对照方高出40％． 因为SPRI-70014抗生素是一个新颖的具有选择性除草活性的抗生素，我们对其产生茵的菌种选育及 其发酵工艺作了一定的研究，发酵单位比原始高出近200％。但是，要使之成为工业化生产还需进一步的研 究开发． 3分离提取与鉴别研究 3．1分离提取： 发酵液过滤，菌体用80％丙酮浸泡，浸泡液减压浓缩除去丙酮后并入发酵上清液中，用正丁醇多次抽 提，浓缩后得褐色油状物．此油状物经硅胶柱层析，以甲醇：氯仿=1：30洗脱，自动部分收集仪收集洗脱液， 培养皿法跟踪测定出其活性部分，并再次把活性部分浓缩至干．用高压液相检测其组分并选择出合适的纯 样，收集其主要峰组分，用培养皿法测定得有效成分SPRI一70014。 3．2鉴别： SPRI一70014 外观：淡黄色油状物 溶解性：可溶于甲醇、乙醇、丙酮、DMSO等：不溶于水。 紫外吸收：210nm； 分子式：C。5H23NO．； 结构式： o CONH2 4生物活性 其中对稗草的地上、地下部分的生长抑制率分别为40％和95％，对苋菜地上地下部分分别为60％和80 为6