马齿苋中儿茶酚胺类活性组分的毛细管区带电泳分离分析的研究.pdfVIP

马齿苋中儿茶酚胺类活性组分的毛细管 区带电泳分离分析研究 姜廷福，师彦平，欧庆瑜 (中国科学院兰州化学物理研究所，甘肃兰州 730000) ulaca 马齿苋又名马舌菜或马齿菜，为马齿科植物马齿苋Pon deraceaL．的全草。多生于田野、村落、 路旁、丘冈。马齿苋性味酸、寒，归肝、大肠经。《本草钢目》记载临床可用于“散血消肿、利肠滑胎、解毒通 淋、治产后虚汗”…。马齿苋资源丰富，我国各地均有生长，夏季采收，略蒸或烫晒干。具有食用和药用双重 价值。自古在民间早已应用，始载《蜀本草》。我国普遍用于清热解毒、散血消肿及一些抗菌消炎方面的治 疗，印度马齿苋早已是治疗心血管疾病的民间药陋】。现代研究表明，马齿苋有降血脂、抗动脉粥样硬化，抗 菌消炎、抗病毒，增强免疫、抗衰老以及对骨骼肌松弛等作用131。马齿苋全草含有较丰富的被称为口一亚 麻酸的叫一3不饱和脂肪酸。这种物质具有多种药理活性，可预防血小板凝聚、冠状动脉痉挛和血栓的形 成，从而能有效地防治冠心病¨】。此外，马齿苋尚能促进人体胰岛素的分泌，调节人体内糖代谢过程，从而 达到降血糖的功效b】。 化学成分研究表明，马齿苋中含有儿茶酚胺类化合物和多种钾盐(硝酸钾、氯化钾、硫酸钾等，以 (DOPA)、苹果酸、柠檬酸、谷氨酸、丙氨酸、蔗糖、葡萄糖、果糖，以及生物碱、香豆精类、黄酮类、强心苷、蒽 醌苷和多种微量元素”161。其中，儿茶酚胺类化合物为马齿苋的主要活性组分，例如马齿苋就是通过所含 的去甲基肾上腺素来降血糖的。虽然马齿苋在我国民间已有几千年的应用历史，但目前无论是其药用剂 型的研究还是食用蔬菜、饮料的开发均处于较低水平。根据马齿苋的临床用药特点，如能开发出不同剂型 的马齿苋制剂，如马齿苋口服液、片剂、注射液、软膏剂、口含片剂、气雾剂、栓剂等，不仅能确保疗效，而且 还给临床用药带来很大的方便。因此，准确测定马齿苋的活性组分、尽早制定马齿苋药用植物的质量标准 就显得尤为重要。 究了马齿苋中去甲基肾上腺素和多巴胺的HPLC测定方法。GC常用于检测中药挥发油组分，且为提高检 测灵敏度往往需要对检测物进行衍生，操作较为繁琐；由于中药成分复杂，HPLC在应用过程中也存在一 些不足，如：仪器平衡时间长、分析时间长、色谱柱易被污染且不容易再生以及样品前处理复杂等。高效毛 细管电泳(HPCE)是20世纪80年代后期发展起来的一种分析技术，由于它具有分离效率高、快速、操作 简便、低成本、污染少、可选择模式多及毛细管容易清洗等特点，被人们广泛应用子中药有效成分的分离 分析n4“91。胡之德等【20l报道了马齿苋中去甲基肾上腺素和多巴胺的CE测定方法，但由于他们使用了荧 光检测器，所以必须对样品进行衍生，费时费力。且由于荧光检测器比较昂贵，该方法不易在实验室间推 广。本研究首次采用紫外检测方法对马齿苋中的去甲基肾上腺素和多巴胺进行了CE测定，并讨论了提 取溶剂和提取方法对NA和DA测定结果的影响，同时研究了马齿苋不同部位中NA和DA的含量。为马 齿苋中的NA和DA的测定及马齿苋植物的质量控制及鉴定提供了一种快速、有效、易于推广的方法。 1 实验部分 1．1 仪器与试剂 BioFocus 300型电泳仪(美国Bio—Rad公司出品)；石英毛细管柱：35 cm式512岫i．d．，有效长度为 ·39· 30 器(上海超声波仪器厂产品)。 去甲基肾上腺素(NA)和多巴胺(DA)(分子结构见图1)购自中国药品与生物制品检定所。马齿苋采 自甘肃兰州。三羟甲基氨基甲烷(Tris)(成都化学试剂厂生产)，H3PO·(上海红卫农药厂生产)，甲醇、乙 腈、异丙醇(天津化学试剂有限公司产品)，所用试剂均为分析纯，所用水为二次去两子水。所有溶液使用 前均需用0．45斗m的滤膜过滤。 ：]耄奶≥一 HOHO王矿也cH2NH2 图1去甲基肾上腺素和多巴胺的结构式 1．2 缓冲液与样品溶液配制 缓冲液：配制量浓度为0．2mol