新生猪胰腺干细胞培养方法的建立.pdfVIP

中国兽医科学 2008，38(11)：990996 ChineseVeterinaryScience 中图分类号 ：Q813．11 文献标识码 ：A 文章编号：l6734696(2008)11-099007 新生猪胰腺干细胞培养方法的建立 吴杭格 ，刘艳梅 ，赵小丽 ，宋海龙 ，兰海楠 ，阎 峰 ，王珊珊 ，郑 鑫 (1．吉林农业大学 动物科学技术学院，吉林 长春 130118；2．东营职业学院，山东 东营 257091) 摘要 ：通过对不同饲养层和培养基以及细胞 因子进行筛选，比较 了各种培养基和细胞生长因子对细胞 传代时间和增殖细胞比例的影响．选择最佳分离条件 ．建立 了新生猪胰腺干细胞体外培养的最佳体系。结果 显示，以成纤维细胞为饲养层，在含 100mI／I胎牛血清的L-DMEM 中添加表皮生长因子、干细胞因子、白 血病抑制 因子的培养液中培养，细胞能快速增殖，多突起、多角形、小圆形、长梭形 4种类型干细胞的增殖比 例适中，而且各种类型的细胞都能长期传代培养。 关键词 ：新生猪；胰腺 ；干细胞；培养方法 Establishmentofaculturemethodforpancreaticstem cellsof thenewborn piglets W U Hang—ge ，IAU Yan—mei!．ZHA()Xiao—li，SONG Hai—long ，LAN Hainan ，YAN Feng ， W ANG Shanshan ．ZHENG Xin (1．Collegeo，AnimalSeien(eA(liaTee^7~ology．JilinAgriculturalUniversity，Chang(’h“”130118，China； 2．1)fm yingVofaliona]College。Dongying257091China Abstract：Inordertoestablishthebestsystem forcultivationofpancreaticstem cellsofthenewborn piglets，raisingcells。culturemediaandcellgrowthfactorswereoptimized，theinfluencesofvariousculture mediaandcellgrowthfactorsonthegenerationtimeandtheratioofproliferationwerecompared，andthe bestisolatedculturesystem waschosen．Theresultsshowedthatthepancreaticsterncellsofthenewborn pigletscouldproliferaterapidlyinL-DMEM with100mI／iFCS，epidermalgrowthfactor。stem cellfac— tor，andleukemiainhibitorusingembryonicfibroblastasraisingcells．Theproportionsofmulti—protuberant cells，polygonalcells．smallround cellsand long fusiform cellsto thecultured cellsweremoderate，and thesefourtypesofcellscouldbeculturedtomanypassages． Keywords：newbornpiglet；pancreas；stem cell；culturemethod 近年来，糖尿病患者在全球范围内大量增加 ，而 现实。猪胰腺干细胞具有同人类胰岛素结构和功能 传统的胰岛素注射治疗不能从根本上解决问题 。虽 最接近的特点 ，是产生所需胰 岛细胞最适宜的动物 然胰岛移植可 以使患者免除长期注射胰 岛素 的烦 胰岛替代细胞的来源。因此 ，猪胰腺干细胞的研究 恼 ，但供体组织来源有限，其供给量远远不能满足临 对糖尿病的治疗具有极其重要的意义和应用价值。 床的需要 。为了解决组织材料匮