盐酸水解对Feulgen染色效果的探讨.pdfVIP

临床与实验病理学杂志 JClinExpPathol2009Oct；25(5) ·561· 盐酸水解对 Feulgen染色效果的探讨 李 媛，金 岩，刘 源，董绍忠 关键词：Feulgen染色；舌肿瘤；DNA 酸液室温浸 1min。蒸馏水洗后入Schiff液中置37℃恒温箱 中图分类号：R446．8；R739．86 文献标识码：B 40rain，亚硫酸钠洗液洗3遍后常规脱水、透明、封固。B组： 文章编号：1001—7399(2009)05—0561—02 切片常规脱蜡至水洗，室温下 8mol／L盐酸水解 10min，流 在常规病理诊断过程中，单靠病理组织细胞形态判断肿 水冲洗5rain，蒸馏水洗后浸入新配制Schiff液中，37℃染30 瘤良恶性有时仍较困难，须借助一些辅助手段，如免疫组织 min，流水洗 3min后常规脱水、透明、封固。C组 ：切片脱蜡 化学染色法等。其中Feulgen染色由于显示细胞核DNA相 至水，用提前预热25℃水预箱 中的5mol／L盐酸水解 30 对含量时较精确，且该法与图像分析相结合进行倍体分析在 min，蒸馏水冲洗2rain，Schiff液 37℃恒温箱50min。亚硫 肿瘤诊断及预后方面具有一定的特异性，已逐渐成为临床重 酸钠洗液浸洗3遍 ，每次5min，流水冲洗 5min后脱水、透 要辅助手段。常规 Feulgen染色时间和染色效果易受盐酸水 明、封 固。 1．2．2 染色后按常规方法进行各组染色效果比较及肿瘤细 解时间和温度影响，染色步骤较为繁杂，需耗时2h。我们选 用 目前临床常用的3种不同染色方法进行比较 ，旨在寻求一 胞 DNA含量分析。采用 HMIAS-2000彩色医学图文分析系 种快速、简便的染色方法，提高染色质量”0j。 统采集图像 ，分析软件多点对染色阳性的细胞测量染色灰度 值 ，累计取均数。SPSS11．0软件行方差分析。 1 材料与方法 2 结果 1．1 材料 取自第四军医大学 口腔医院病理科肿瘤手术切 除标本 ，舌部低分化鳞癌、高分化鳞癌各20例，诊断结果均 2．1 染色时间 3种不同染色时间相比：用 25℃水预箱中 由3位资深教授会诊得出，标本年龄均在 50—60岁之间，男 预热5mol／L盐酸水解法 (C组)染色时间最长，约2h；常规 女不限。常规 10％福尔马林固定 ，脱水、石蜡包埋，切片厚5 1mol／L60℃预热法 (A组)约需 1．5h；用室温8mol／L盐酸 m。每种组织均切片3张，Schiff液选择传统热配法。 水解法 (B组)在程序上相对简单易行 ，且时间也缩短，耗时 1．2 方法 1h。 1．2．1 A组：切片脱蜡至水 ，常规 1mol／L盐酸室温浸 1 2．2 染色结果 rain，60℃预热 1mol／L盐酸浸8min，水解后再次 1mol／L盐 2．2．1 镜检 应用上述染色方法，C组水解法显示细胞核 染色淡，结构较清晰(图1)。常规A组60~C预热法细胞核 收稿 日期：2009—05—21 染色深，结构清晰(图2)。B组水解法细胞核染色深，结构 作者单位：第 四军医大学 口腔 医学院组织病理学教研室，西安 清晰(图3)，效果最为理想。 710o32 2．2．2 DNA含量分析结果 C组DNA倍体分析数据较 A、 作者简介：李 媛，女，主管技师。E．mail：lilili@fmmu．edu．cn B组不明确 (P0．O1)；A、B种染色所获结果检测数据相似 液。视标本中所含黏液的多少加入 3～10滴不等 ，富含黏液 个制片过